中华传染病杂志
中華傳染病雜誌
중화전염병잡지
CHINESE JOURNAL OF INFECTIOUS DISEASES
2005年
5期
297-300
,共4页
冯国和%王玉梅%刘沛%王占英%乔光彦
馮國和%王玉梅%劉沛%王佔英%喬光彥
풍국화%왕옥매%류패%왕점영%교광언
脑炎病毒,日本%病毒蛋白质类%基因表达%免疫印迹法%中和试验%疫苗,DNA
腦炎病毒,日本%病毒蛋白質類%基因錶達%免疫印跡法%中和試驗%疫苗,DNA
뇌염병독,일본%병독단백질류%기인표체%면역인적법%중화시험%역묘,DNA
目的研究乙型脑炎病毒prME、E蛋白表达特点,比较不同接种途径所致DNA免疫效率.方法脂质体法将质粒(pJME、pJE)转染于HepG2、COS-1及KN73细胞;免疫印迹法分析质粒表达及与转染剂量关系,鉴定DNA免疫鼠血清抗体性质;肌内(100μg/次)与基因枪(3μg/次)注射法将质粒免疫BALB/c鼠,腹腔注射乙型脑炎病毒(105PFU/100μl)进行病毒攻击.80%空斑减少中和试验法检测中和抗体滴度.结果pJME转染的细胞内可检测到相对分子质量约为72×103与11×103两种蛋白,pJE转染的细胞内检测到相对分子质量约为54×103蛋白.蛋白表达程度由高至低顺序为10μg/孔＞5 μg/孔＞3μg/孔.pJME与JE灭活疫苗免疫的BALB/c鼠在病毒攻击后21 d全部存活,pJE免疫鼠部分存活.pJME所致中和抗体滴度高于pJE.肌内注射组所致的最终中和抗体滴度等同于基因枪注射组.pJME免疫鼠产生血清抗体仅与JEVE蛋白发生反应.结论pJME与pJE在不同转染细胞内表达效率不同;转染剂量和蛋白表达呈一定剂量依赖性;pJME免疫效果优于pJE,基因枪注射所致免疫效率高于肌内注射;DNA免疫所致的中和抗体效价水平与保护性免疫效果呈一致性;DNA免疫鼠血清中和抗体含针对JEV E蛋白的抗JEV-E抗体.
目的研究乙型腦炎病毒prME、E蛋白錶達特點,比較不同接種途徑所緻DNA免疫效率.方法脂質體法將質粒(pJME、pJE)轉染于HepG2、COS-1及KN73細胞;免疫印跡法分析質粒錶達及與轉染劑量關繫,鑒定DNA免疫鼠血清抗體性質;肌內(100μg/次)與基因鎗(3μg/次)註射法將質粒免疫BALB/c鼠,腹腔註射乙型腦炎病毒(105PFU/100μl)進行病毒攻擊.80%空斑減少中和試驗法檢測中和抗體滴度.結果pJME轉染的細胞內可檢測到相對分子質量約為72×103與11×103兩種蛋白,pJE轉染的細胞內檢測到相對分子質量約為54×103蛋白.蛋白錶達程度由高至低順序為10μg/孔＞5 μg/孔＞3μg/孔.pJME與JE滅活疫苗免疫的BALB/c鼠在病毒攻擊後21 d全部存活,pJE免疫鼠部分存活.pJME所緻中和抗體滴度高于pJE.肌內註射組所緻的最終中和抗體滴度等同于基因鎗註射組.pJME免疫鼠產生血清抗體僅與JEVE蛋白髮生反應.結論pJME與pJE在不同轉染細胞內錶達效率不同;轉染劑量和蛋白錶達呈一定劑量依賴性;pJME免疫效果優于pJE,基因鎗註射所緻免疫效率高于肌內註射;DNA免疫所緻的中和抗體效價水平與保護性免疫效果呈一緻性;DNA免疫鼠血清中和抗體含針對JEV E蛋白的抗JEV-E抗體.
목적연구을형뇌염병독prME、E단백표체특점,비교불동접충도경소치DNA면역효솔.방법지질체법장질립(pJME、pJE)전염우HepG2、COS-1급KN73세포;면역인적법분석질립표체급여전염제량관계,감정DNA면역서혈청항체성질;기내(100μg/차)여기인창(3μg/차)주사법장질립면역BALB/c서,복강주사을형뇌염병독(105PFU/100μl)진행병독공격.80%공반감소중화시험법검측중화항체적도.결과pJME전염적세포내가검측도상대분자질량약위72×103여11×103량충단백,pJE전염적세포내검측도상대분자질량약위54×103단백.단백표체정도유고지저순서위10μg/공＞5 μg/공＞3μg/공.pJME여JE멸활역묘면역적BALB/c서재병독공격후21 d전부존활,pJE면역서부분존활.pJME소치중화항체적도고우pJE.기내주사조소치적최종중화항체적도등동우기인창주사조.pJME면역서산생혈청항체부여JEVE단백발생반응.결론pJME여pJE재불동전염세포내표체효솔불동;전염제량화단백표체정일정제량의뢰성;pJME면역효과우우pJE,기인창주사소치면역효솔고우기내주사;DNA면역소치적중화항체효개수평여보호성면역효과정일치성;DNA면역서혈청중화항체함침대JEV E단백적항JEV-E항체.
