热带医学杂志
熱帶醫學雜誌
열대의학잡지
JOURNAL OF TROPICAL MEDICINE
2004年
2期
126-129
,共4页
邵筱%余新炳%吴忠道%王海%梁柏年%李宝华
邵篠%餘新炳%吳忠道%王海%樑柏年%李寶華
소소%여신병%오충도%왕해%량백년%리보화
硫氧还蛋白%日本血吸虫%生物信息学%电子延伸%克隆和表达
硫氧還蛋白%日本血吸蟲%生物信息學%電子延伸%剋隆和錶達
류양환단백%일본혈흡충%생물신식학%전자연신%극륭화표체
目的结合分子生物学和生物信息学方法筛选鉴定日本血吸虫新基因.方法从日本血吸虫(Schistosoma japonicum,大陆株)成虫cDNA文库中获取表达序列标签(expressed sequence tag,EST),用电子拼接的方法延伸序列,用NCBI提供的BLASTx程序和Genbank数据库进行同源性分析以筛选基因;设计特异性引物从日本血吸虫成虫mRNA中扩增筛选基因并预测和分析;扩增产物克隆到原核表达载体并表达.结果筛选出日本血吸虫Thioredoxin全长基因并对其进行了序列分析,克隆全长cDNA至PET原核载体并表达成功.结论结合EST、电子延伸和传统的分子生物学方法是高效筛选S.japonicum功能基因的有效策略.
目的結閤分子生物學和生物信息學方法篩選鑒定日本血吸蟲新基因.方法從日本血吸蟲(Schistosoma japonicum,大陸株)成蟲cDNA文庫中穫取錶達序列標籤(expressed sequence tag,EST),用電子拼接的方法延伸序列,用NCBI提供的BLASTx程序和Genbank數據庫進行同源性分析以篩選基因;設計特異性引物從日本血吸蟲成蟲mRNA中擴增篩選基因併預測和分析;擴增產物剋隆到原覈錶達載體併錶達.結果篩選齣日本血吸蟲Thioredoxin全長基因併對其進行瞭序列分析,剋隆全長cDNA至PET原覈載體併錶達成功.結論結閤EST、電子延伸和傳統的分子生物學方法是高效篩選S.japonicum功能基因的有效策略.
목적결합분자생물학화생물신식학방법사선감정일본혈흡충신기인.방법종일본혈흡충(Schistosoma japonicum,대륙주)성충cDNA문고중획취표체서렬표첨(expressed sequence tag,EST),용전자병접적방법연신서렬,용NCBI제공적BLASTx정서화Genbank수거고진행동원성분석이사선기인;설계특이성인물종일본혈흡충성충mRNA중확증사선기인병예측화분석;확증산물극륭도원핵표체재체병표체.결과사선출일본혈흡충Thioredoxin전장기인병대기진행료서렬분석,극륭전장cDNA지PET원핵재체병표체성공.결론결합EST、전자연신화전통적분자생물학방법시고효사선S.japonicum공능기인적유효책략.
