CAJ | 학술논문

目的建立改良分子信标-双重实时荧光PCR检测SARS病毒的方法,用于SARS的早期诊断和动物溯源.方法利用改良分子信标技术、装甲RNA和双片段双色荧光技术,根据GenBank公布的SARS病毒聚合酶基因1b的阅读开放框架结构的保守序列,自行设计一对引物和探针,以部分临床标本的酶联吸附实验结果和传统细胞培养方法作为对照,建立分子信标检测SARS病毒的方法.对368份临床标本(咽漱液、血液、粪便、尿液)、52份细胞培养液和50份动物标本进行荧光PCR扩增.结果分子信标检测SARS病毒的方法灵敏度为10～100个拷贝/ml,与流感病毒等呼吸道病毒无交叉反应.分子信标检测368份临床标本,20份阳性.其中确诊病例阳性率为21.27%(10/47),确诊病例的咽漱液阳性率为43.48%,还分别从粪便和血清中检测到SARS病毒.52份细胞培养液,29份阳性,阳性率为55.77%.50份动物标本,23份阳性,阳性率为46%.结论改良分子信标-双重实时荧光PCR检测SARS病毒方法灵敏度高、特异性强,可用于SARS的临床早期诊断和动物溯源.
목적건립개량분자신표-쌍중실시형광PCR검측SARS병독적방법,용우SARS적조기진단화동물소원.방법이용개량분자신표기술、장갑RNA화쌍편단쌍색형광기술,근거GenBank공포적SARS병독취합매기인1b적열독개방광가결구적보수서렬,자행설계일대인물화탐침,이부분림상표본적매련흡부실험결과화전통세포배양방법작위대조,건립분자신표검측SARS병독적방법.대368빈림상표본(인수액、혈액、분편、뇨액)、52빈세포배양액화50빈동물표본진행형광PCR확증.결과분자신표검측SARS병독적방법령민도위10～100개고패/ml,여류감병독등호흡도병독무교차반응.분자신표검측368빈림상표본,20빈양성.기중학진병례양성솔위21.27%(10/47),학진병례적인수액양성솔위43.48%,환분별종분편화혈청중검측도SARS병독.52빈세포배양액,29빈양성,양성솔위55.77%.50빈동물표본,23빈양성,양성솔위46%.결론개량분자신표-쌍중실시형광PCR검측SARS병독방법령민도고、특이성강,가용우SARS적림상조기진단화동물소원.