CAJ | 학술논문

目的:探讨细菌衍生黑素(b-melanin)对长波紫外线(UVA)诱导人成纤维细胞凋亡和坏死产生的光保护作用,为今后将其用作皮肤光保护剂提供依据.方法:正常人成纤维细胞(NL-FB)和着色性干皮病患者成纤维细胞(XP-FB)经UVA照射12 h后,以四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测细胞存活率,Hoechst33258染色法观察早期凋亡细胞核形态学变化.二氯荧光素二酯(DCFH-DA)标记法测定细胞内活性氧基(ROS)水平.结果:UVA照射诱导细胞的半数致死剂量,XP-FB大约为30 J/cm2,而NL-FB＞40 J/cm2.为了观察不同浓度(0,25,50,100,200,400,和800 μg/mL)的b-melanin是否对细胞存在光保护作用,给予半数致死剂量(30 J/cm2)UVA照射后,经100～400 μg/mL b-melanin处理的XP-FB的细胞存活率均较未处理组明显增高(P＜0.01),而NL-FB的细胞存活率变化不明显.细胞内ROS测定结果显示100、400 μg/mL的b-melanin能明显清除UVA诱导产生的ROS.100 μg/mL b-melanin即能阻止非致死剂量(16 J/cm2)UVA照射诱导的早期凋亡细胞核改变.结论:b-melanin能对UVA诱导人成纤维细胞凋亡和坏死提供有效的光保护,这一作用很可能关系到b-melanin对ROS的清除.本研究还首次提出核酸切除修复机制缺陷的XP-FB是一敏感的可用于测试UVA光损伤作用的体外细胞模型.
목적:탐토세균연생흑소(b-melanin)대장파자외선(UVA)유도인성섬유세포조망화배사산생적광보호작용,위금후장기용작피부광보호제제공의거.방법:정상인성섬유세포(NL-FB)화착색성간피병환자성섬유세포(XP-FB)경UVA조사12 h후,이사갑기우담서람(MTT)법검측세포존활솔,Hoechst33258염색법관찰조기조망세포핵형태학변화.이록형광소이지(DCFH-DA)표기법측정세포내활성양기(ROS)수평.결과:UVA조사유도세포적반수치사제량,XP-FB대약위30 J/cm2,이NL-FB＞40 J/cm2.위료관찰불동농도(0,25,50,100,200,400,화800 μg/mL)적b-melanin시부대세포존재광보호작용,급여반수치사제량(30 J/cm2)UVA조사후,경100～400 μg/mL b-melanin처리적XP-FB적세포존활솔균교미처리조명현증고(P＜0.01),이NL-FB적세포존활솔변화불명현.세포내ROS측정결과현시100、400 μg/mL적b-melanin능명현청제UVA유도산생적ROS.100 μg/mL b-melanin즉능조지비치사제량(16 J/cm2)UVA조사유도적조기조망세포핵개변.결론:b-melanin능대UVA유도인성섬유세포조망화배사제공유효적광보호,저일작용흔가능관계도b-melanin대ROS적청제.본연구환수차제출핵산절제수복궤제결함적XP-FB시일민감적가용우측시UVA광손상작용적체외세포모형.