CAJ | 학술논문

背景:血小板裂解液是将浓缩血小板进一步裂解后所获得的液体成分,含有多种生物活性因子.有研究认为血小板裂解液可促进成骨细胞的增殖,而其对骨髓间充质干细胞生物学功能的影响还不太了解.目的:探讨血小板裂解液对大鼠骨髓间充质干细胞生长增殖的影响.设计、时间及地点:独立样本观察,于2007-09/2008-01在山西省医用组织库完成实验.材料:清洁级成年健康Wistar大鼠8只.方法:取2只大鼠股骨,全骨髓培养法传代扩增骨髓间充质干细胞.自6只大鼠心内采血,采用3次离心结合反复冻融法制备血小板裂解液.取第5代骨髓间充质干细胞,以含10%胎牛血清的L-DMEM/F12作为基础培养基组,在此基础上分别加入血小板裂解液至终浓度为1%和5%作为条件培养基组.主要观察指标:ELISA法测定血小板裂解液中生长因子含量.CASY细胞分析仪计数活细胞.双缩脲法全自动生化分析仪检测细胞总蛋白含量.倒置显微镜动态观察细胞形态变化与生长状况.结果:[1]血小板裂解液中的血小板衍生生长因子、转化生长因子B 1、胰岛素样生长因子1和血管内皮细胞生长因子含量分别为(300±30), (140±25), (80±35), (70±20)ng/L.[2]自培养第3天开始,条件培养基组活细胞数均明显高于基础培养基组(p<0.05),且含5%血小板裂解液的条件培养基组升高幅度尤为显著,于第3天达到对数生长期,比基础培养基组提前约1d,细胞总数在第4,9天时达基础培养基组的近3倍.[3]培养1周后条件培养基组每106个细胞中的总蛋白含量均显著高于基础培养基组(P<0.05).[4]骨髓间充质干细胞在不同浓度血小板裂解液培养条件下,细胞形态基本一致,多为长梭形,类似于成纤维细胞.结论:血小板裂解液是多种生长因子的承载体系,具有丝裂原功效,可在体外促进大鼠骨髓间充质干细胞的生长增殖,且该效应存在一定程度的剂量依赖性. 揹景:血小闆裂解液是將濃縮血小闆進一步裂解後所穫得的液體成分,含有多種生物活性因子.有研究認為血小闆裂解液可促進成骨細胞的增殖,而其對骨髓間充質榦細胞生物學功能的影響還不太瞭解.目的:探討血小闆裂解液對大鼠骨髓間充質榦細胞生長增殖的影響.設計、時間及地點:獨立樣本觀察,于2007-09/2008-01在山西省醫用組織庫完成實驗.材料:清潔級成年健康Wistar大鼠8隻.方法:取2隻大鼠股骨,全骨髓培養法傳代擴增骨髓間充質榦細胞.自6隻大鼠心內採血,採用3次離心結閤反複凍融法製備血小闆裂解液.取第5代骨髓間充質榦細胞,以含10%胎牛血清的L-DMEM/F12作為基礎培養基組,在此基礎上分彆加入血小闆裂解液至終濃度為1%和5%作為條件培養基組.主要觀察指標:ELISA法測定血小闆裂解液中生長因子含量.CASY細胞分析儀計數活細胞.雙縮脲法全自動生化分析儀檢測細胞總蛋白含量.倒置顯微鏡動態觀察細胞形態變化與生長狀況.結果:[1]血小闆裂解液中的血小闆衍生生長因子、轉化生長因子B 1、胰島素樣生長因子1和血管內皮細胞生長因子含量分彆為(300±30), (140±25), (80±35), (70±20)ng/L.[2]自培養第3天開始,條件培養基組活細胞數均明顯高于基礎培養基組(p<0.05),且含5%血小闆裂解液的條件培養基組升高幅度尤為顯著,于第3天達到對數生長期,比基礎培養基組提前約1d,細胞總數在第4,9天時達基礎培養基組的近3倍.[3]培養1週後條件培養基組每106箇細胞中的總蛋白含量均顯著高于基礎培養基組(P<0.05).[4]骨髓間充質榦細胞在不同濃度血小闆裂解液培養條件下,細胞形態基本一緻,多為長梭形,類似于成纖維細胞.結論:血小闆裂解液是多種生長因子的承載體繫,具有絲裂原功效,可在體外促進大鼠骨髓間充質榦細胞的生長增殖,且該效應存在一定程度的劑量依賴性.
배경:혈소판렬해액시장농축혈소판진일보렬해후소획득적액체성분,함유다충생물활성인자.유연구인위혈소판렬해액가촉진성골세포적증식,이기대골수간충질간세포생물학공능적영향환불태료해.목적:탐토혈소판렬해액대대서골수간충질간세포생장증식적영향.설계、시간급지점:독립양본관찰,우2007-09/2008-01재산서성의용조직고완성실험.재료:청길급성년건강Wistar대서8지.방법:취2지대서고골,전골수배양법전대확증골수간충질간세포.자6지대서심내채혈,채용3차리심결합반복동융법제비혈소판렬해액.취제5대골수간충질간세포,이함10%태우혈청적L-DMEM/F12작위기출배양기조,재차기출상분별가입혈소판렬해액지종농도위1%화5%작위조건배양기조.주요관찰지표:ELISA법측정혈소판렬해액중생장인자함량.CASY세포분석의계수활세포.쌍축뇨법전자동생화분석의검측세포총단백함량.도치현미경동태관찰세포형태변화여생장상황.결과:[1]혈소판렬해액중적혈소판연생생장인자、전화생장인자B 1、이도소양생장인자1화혈관내피세포생장인자함량분별위(300±30), (140±25), (80±35), (70±20)ng/L.[2]자배양제3천개시,조건배양기조활세포수균명현고우기출배양기조(p<0.05),차함5%혈소판렬해액적조건배양기조승고폭도우위현저,우제3천체도대수생장기,비기출배양기조제전약1d,세포총수재제4,9천시체기출배양기조적근3배.[3]배양1주후조건배양기조매106개세포중적총단백함량균현저고우기출배양기조(P<0.05).[4]골수간충질간세포재불동농도혈소판렬해액배양조건하,세포형태기본일치,다위장사형,유사우성섬유세포.결론:혈소판렬해액시다충생장인자적승재체계,구유사렬원공효,가재체외촉진대서골수간충질간세포적생장증식,차해효응존재일정정도적제량의뢰성.