组织工程与重建外科杂志
組織工程與重建外科雜誌
조직공정여중건외과잡지
JOURNAL OF TISSUE ENGINEERING AND RECONSTRUCTIVE SURGERY
2008年
5期
259-262,287
,共5页
洪坦辉%金羽青%戴传昌%董佳生%祁佐良%王毅敏%刘伟%曹谊林
洪坦輝%金羽青%戴傳昌%董佳生%祁佐良%王毅敏%劉偉%曹誼林
홍탄휘%금우청%대전창%동가생%기좌량%왕의민%류위%조의림
雪旺细胞%纯化%差速分离%胶原酶%周围神经再生
雪旺細胞%純化%差速分離%膠原酶%週圍神經再生
설왕세포%순화%차속분리%효원매%주위신경재생
目的 建立高效、快速获得大量高纯度雪旺细胞的方法,为组织工程神经构建提供优质、足量的种子细胞.方法 取新生6～7 d的小鼠,在解剖显微镜下分离双侧坐骨神经,0.25%复合胶原酶37℃消化90 min,然后将细胞悬液接种于预先用层粘蛋白铺盘的培养瓶,贴壁培养48 h后,0.05%复合胶原酶37℃消化30 min,振荡分离雪旺细胞与成纤维细胞.经过两次纯化后,运用免疫细胞化学和流式细胞仪检测所得的雪旺细胞的纯度.结果 经过两次纯化后,P75NTR免疫细胞化学及流式细胞仪检测证实,通过本方法可获得纯度为99%以上的雪旺细胞,每个25 cm2培养瓶可获得(102.8±5.9)×104个细胞.结论 复合胶原酶差速消化法是一种高效、快捷的雪旺细胞纯化方法,仅需5 d即可制备高纯度的雪旺细胞.
目的 建立高效、快速穫得大量高純度雪旺細胞的方法,為組織工程神經構建提供優質、足量的種子細胞.方法 取新生6～7 d的小鼠,在解剖顯微鏡下分離雙側坐骨神經,0.25%複閤膠原酶37℃消化90 min,然後將細胞懸液接種于預先用層粘蛋白鋪盤的培養瓶,貼壁培養48 h後,0.05%複閤膠原酶37℃消化30 min,振盪分離雪旺細胞與成纖維細胞.經過兩次純化後,運用免疫細胞化學和流式細胞儀檢測所得的雪旺細胞的純度.結果 經過兩次純化後,P75NTR免疫細胞化學及流式細胞儀檢測證實,通過本方法可穫得純度為99%以上的雪旺細胞,每箇25 cm2培養瓶可穫得(102.8±5.9)×104箇細胞.結論 複閤膠原酶差速消化法是一種高效、快捷的雪旺細胞純化方法,僅需5 d即可製備高純度的雪旺細胞.
목적 건립고효、쾌속획득대량고순도설왕세포적방법,위조직공정신경구건제공우질、족량적충자세포.방법 취신생6～7 d적소서,재해부현미경하분리쌍측좌골신경,0.25%복합효원매37℃소화90 min,연후장세포현액접충우예선용층점단백포반적배양병,첩벽배양48 h후,0.05%복합효원매37℃소화30 min,진탕분리설왕세포여성섬유세포.경과량차순화후,운용면역세포화학화류식세포의검측소득적설왕세포적순도.결과 경과량차순화후,P75NTR면역세포화학급류식세포의검측증실,통과본방법가획득순도위99%이상적설왕세포,매개25 cm2배양병가획득(102.8±5.9)×104개세포.결론 복합효원매차속소화법시일충고효、쾌첩적설왕세포순화방법,부수5 d즉가제비고순도적설왕세포.
