CAJ | 학술논문

本研究探讨细胞酸化对K562/A02细胞中P-糖蛋白(P-glycoprotein,P-gp)的影响,为抗白血病多药耐药(multidrug resistance,MDR)提供新方法.利用高钾缓冲液对细胞进行酸化,应用激光共聚焦显微镜测定K562及K562/A02细胞内pH值(intracellular pH,pH,);采用MTT法观察细胞酸化对细胞活力的影响;应用流式细胞术检测细胞酸化对K562/A02细胞中P-gp功能的影响;分别采用Western blot及实时定量RT-PCR技术检测P-gp的蛋白表达水平和mRNA表达水平的变化.结果表明:细胞酸化3小时对K562及K562/A02细胞的活力影响较小.在K562/A02细胞中,P-gp的功能随pH1的降低而减弱,细胞酸化明显增加了细胞对罗丹明123(Rhodamine 123,Rh123)的累积,并抑制了P-gp介导的Rh123外排.细胞酸化还分别在蛋白水平和mRNA水平抑制了K562/A02细胞中P-gp的表达,并且这种抑制具有pH1及时间的依赖性.结论:细胞酸化能够抑制K562/A02耐药细胞株中P-gp的表达和功能.
본연구탐토세포산화대K562/A02세포중P-당단백(P-glycoprotein,P-gp)적영향,위항백혈병다약내약(multidrug resistance,MDR)제공신방법.이용고갑완충액대세포진행산화,응용격광공취초현미경측정K562급K562/A02세포내pH치(intracellular pH,pH,);채용MTT법관찰세포산화대세포활력적영향;응용류식세포술검측세포산화대K562/A02세포중P-gp공능적영향;분별채용Western blot급실시정량RT-PCR기술검측P-gp적단백표체수평화mRNA표체수평적변화.결과표명:세포산화3소시대K562급K562/A02세포적활력영향교소.재K562/A02세포중,P-gp적공능수pH1적강저이감약,세포산화명현증가료세포대라단명123(Rhodamine 123,Rh123)적루적,병억제료P-gp개도적Rh123외배.세포산화환분별재단백수평화mRNA수평억제료K562/A02세포중P-gp적표체,병차저충억제구유pH1급시간적의뢰성.결론:세포산화능구억제K562/A02내약세포주중P-gp적표체화공능.