安徽农业科学
安徽農業科學
안휘농업과학
JOURNAL OF ANHUI AGRICULTURAL SCIENCES
2011年
2期
697-700
,共4页
华北落叶松%AFLP反应体系%建立%优化
華北落葉鬆%AFLP反應體繫%建立%優化
화북락협송%AFLP반응체계%건립%우화
[目的]建立和优化华北落叶松(Larix principis-rupprechtii Mayr.)的AFLP反应体系.[方法]以华北落叶松为材料,对其AFLP分析过程中的5个主要影响因素(酶切时间、内切酶用量、DNA模板用量、连接产物和预扩增产物稀释倍数)进行了研究.[结果]确立了适于华北落叶松AFLP分析的最佳反应体系,即在反应体积均为20.0 μl的前提下,酶切时间为7 h(37 ℃ 3.5 h;65 ℃ 3.5 h),EcoR Ⅰ和Mse Ⅰ内切酶用量均为1 U,DNA模板用量为3.0 μl(50 ng/μl),连接产物稀释10倍取5.0 μl用于预扩增,预扩增产物稀释70倍取4.0 μl用于选择性扩增.[结论]采用该体系得到的电泳条带清晰可辨、多态性好、重复性强,可用于对华北落叶松遗传多样性和分子进化特征的深入研究.
[目的]建立和優化華北落葉鬆(Larix principis-rupprechtii Mayr.)的AFLP反應體繫.[方法]以華北落葉鬆為材料,對其AFLP分析過程中的5箇主要影響因素(酶切時間、內切酶用量、DNA模闆用量、連接產物和預擴增產物稀釋倍數)進行瞭研究.[結果]確立瞭適于華北落葉鬆AFLP分析的最佳反應體繫,即在反應體積均為20.0 μl的前提下,酶切時間為7 h(37 ℃ 3.5 h;65 ℃ 3.5 h),EcoR Ⅰ和Mse Ⅰ內切酶用量均為1 U,DNA模闆用量為3.0 μl(50 ng/μl),連接產物稀釋10倍取5.0 μl用于預擴增,預擴增產物稀釋70倍取4.0 μl用于選擇性擴增.[結論]採用該體繫得到的電泳條帶清晰可辨、多態性好、重複性彊,可用于對華北落葉鬆遺傳多樣性和分子進化特徵的深入研究.
[목적]건립화우화화북락협송(Larix principis-rupprechtii Mayr.)적AFLP반응체계.[방법]이화북락협송위재료,대기AFLP분석과정중적5개주요영향인소(매절시간、내절매용량、DNA모판용량、련접산물화예확증산물희석배수)진행료연구.[결과]학립료괄우화북락협송AFLP분석적최가반응체계,즉재반응체적균위20.0 μl적전제하,매절시간위7 h(37 ℃ 3.5 h;65 ℃ 3.5 h),EcoR Ⅰ화Mse Ⅰ내절매용량균위1 U,DNA모판용량위3.0 μl(50 ng/μl),련접산물희석10배취5.0 μl용우예확증,예확증산물희석70배취4.0 μl용우선택성확증.[결론]채용해체계득도적전영조대청석가변、다태성호、중복성강,가용우대화북락협송유전다양성화분자진화특정적심입연구.
