中国免疫学杂志
中國免疫學雜誌
중국면역학잡지
CHINESE JOURNAL OF IMMUNOLOGY
2012年
1期
41-44
,共4页
张淑芹%梁重阳%刘志屹%戴璐%张福明%孙非
張淑芹%樑重暘%劉誌屹%戴璐%張福明%孫非
장숙근%량중양%류지흘%대로%장복명%손비
重组灵芝免疫调节蛋白(rLZ-8)%细胞融合%单克隆抗体%效价
重組靈芝免疫調節蛋白(rLZ-8)%細胞融閤%單剋隆抗體%效價
중조령지면역조절단백(rLZ-8)%세포융합%단극륭항체%효개
目的:制备重组灵芝免疫调节蛋白(rLZ-8)单克隆抗体,为rLZ-8的药效学及药代动力学研究奠定基础.方法:以纯度99%的rLZ-8免疫BALB/c小鼠;应用常规的细胞融合技术建立一种能够稳定分泌抗rLZ-8单克隆抗体的杂交瘤细胞株;采用小鼠腹腔接种法制备腹水;Protein A Sepharose 亲和层析柱在AKTA纯化仪上对抗体进行纯化;间接ELISA方法测定单克隆抗体的效价;Western blot胶片曝光方法对rLZ-8单克隆抗体特异性进行分析.结果:筛选出2株可特异性分泌抗rLZ-8单克隆抗体的杂交瘤细胞株.分别命名为clone13-2-3和clone11-4-4.其抗体亚型分别为IgG1亚型和IgG2a亚型.腹水抗体效价分别为1:12 000和1:7 500,细胞培养上清效价分别为1:3 000和1:2 800.Western blot检测证明这两株杂交瘤细胞所分泌的单克隆抗体均具有良好的特异性.结论:成功制备出较高效价和较高特异性的鼠抗rLZ-8的单克隆抗体.
目的:製備重組靈芝免疫調節蛋白(rLZ-8)單剋隆抗體,為rLZ-8的藥效學及藥代動力學研究奠定基礎.方法:以純度99%的rLZ-8免疫BALB/c小鼠;應用常規的細胞融閤技術建立一種能夠穩定分泌抗rLZ-8單剋隆抗體的雜交瘤細胞株;採用小鼠腹腔接種法製備腹水;Protein A Sepharose 親和層析柱在AKTA純化儀上對抗體進行純化;間接ELISA方法測定單剋隆抗體的效價;Western blot膠片曝光方法對rLZ-8單剋隆抗體特異性進行分析.結果:篩選齣2株可特異性分泌抗rLZ-8單剋隆抗體的雜交瘤細胞株.分彆命名為clone13-2-3和clone11-4-4.其抗體亞型分彆為IgG1亞型和IgG2a亞型.腹水抗體效價分彆為1:12 000和1:7 500,細胞培養上清效價分彆為1:3 000和1:2 800.Western blot檢測證明這兩株雜交瘤細胞所分泌的單剋隆抗體均具有良好的特異性.結論:成功製備齣較高效價和較高特異性的鼠抗rLZ-8的單剋隆抗體.
목적:제비중조령지면역조절단백(rLZ-8)단극륭항체,위rLZ-8적약효학급약대동역학연구전정기출.방법:이순도99%적rLZ-8면역BALB/c소서;응용상규적세포융합기술건립일충능구은정분비항rLZ-8단극륭항체적잡교류세포주;채용소서복강접충법제비복수;Protein A Sepharose 친화층석주재AKTA순화의상대항체진행순화;간접ELISA방법측정단극륭항체적효개;Western blot효편폭광방법대rLZ-8단극륭항체특이성진행분석.결과:사선출2주가특이성분비항rLZ-8단극륭항체적잡교류세포주.분별명명위clone13-2-3화clone11-4-4.기항체아형분별위IgG1아형화IgG2a아형.복수항체효개분별위1:12 000화1:7 500,세포배양상청효개분별위1:3 000화1:2 800.Western blot검측증명저량주잡교류세포소분비적단극륭항체균구유량호적특이성.결론:성공제비출교고효개화교고특이성적서항rLZ-8적단극륭항체.
