中国组织工程研究
中國組織工程研究
중국조직공정연구
Journal of Clinical Rehabilitative Tissue Engineering Research
2012年
11期
1933-1936
,共4页
丁建东%方翔%李开如%姚玉宇%陶绍玉%王点%马根山
丁建東%方翔%李開如%姚玉宇%陶紹玉%王點%馬根山
정건동%방상%리개여%요옥우%도소옥%왕점%마근산
转录因子%Nkx2.5%GATA4%脑钠肽%先天性心脏病
轉錄因子%Nkx2.5%GATA4%腦鈉肽%先天性心髒病
전록인자%Nkx2.5%GATA4%뇌납태%선천성심장병
背景:心脏发育过程是复杂多种因子相互作用的结果,对转录因子Nkx2.5 和GATA4 在心脏发育过程中相互作用的研究将有助进一步了解心脏发育过程.目的:分析心脏转录因子Nkx2.5 和GATA4 在细胞内的相互作用.方法:在构建Nkx2.5 和GATA4 真核表达质粒以及脑钠肽启动子荧光表达质粒的基础上,将真核表达质粒经共转染或单转染COS7 细胞,利用免疫共沉淀技术验证Nkx2.5和GATA4 在细胞内是否有相互作用,并通过荧光素酶分析技术分析Nkx2.5和GATA4 对脑钠肽启动子序列可能存在的协同激活作用.结果与结论:通过免疫共沉淀实验发现GATA4 能将Nkx2.5 沉淀下来,相应的Nkx2.5 也能将GATA4 沉淀下来,说明在COS7 细胞中,GATA4 能和Nkx2.5 相互作用.脑钠肽启动子荧光表达质粒并与Nkx2.5 和GATA4 共转染COS7 细胞,比起单转染Nkx2.5 或GATA4 质粒,两者共转染更能激活脑钠肽启动子的表达.Nkx2.5 和GATA4 不仅各自在心脏发育过程中发挥重要作用,两者之间的相互协调作用对于心脏的正常发育过程同样非常重要.
揹景:心髒髮育過程是複雜多種因子相互作用的結果,對轉錄因子Nkx2.5 和GATA4 在心髒髮育過程中相互作用的研究將有助進一步瞭解心髒髮育過程.目的:分析心髒轉錄因子Nkx2.5 和GATA4 在細胞內的相互作用.方法:在構建Nkx2.5 和GATA4 真覈錶達質粒以及腦鈉肽啟動子熒光錶達質粒的基礎上,將真覈錶達質粒經共轉染或單轉染COS7 細胞,利用免疫共沉澱技術驗證Nkx2.5和GATA4 在細胞內是否有相互作用,併通過熒光素酶分析技術分析Nkx2.5和GATA4 對腦鈉肽啟動子序列可能存在的協同激活作用.結果與結論:通過免疫共沉澱實驗髮現GATA4 能將Nkx2.5 沉澱下來,相應的Nkx2.5 也能將GATA4 沉澱下來,說明在COS7 細胞中,GATA4 能和Nkx2.5 相互作用.腦鈉肽啟動子熒光錶達質粒併與Nkx2.5 和GATA4 共轉染COS7 細胞,比起單轉染Nkx2.5 或GATA4 質粒,兩者共轉染更能激活腦鈉肽啟動子的錶達.Nkx2.5 和GATA4 不僅各自在心髒髮育過程中髮揮重要作用,兩者之間的相互協調作用對于心髒的正常髮育過程同樣非常重要.
배경:심장발육과정시복잡다충인자상호작용적결과,대전록인자Nkx2.5 화GATA4 재심장발육과정중상호작용적연구장유조진일보료해심장발육과정.목적:분석심장전록인자Nkx2.5 화GATA4 재세포내적상호작용.방법:재구건Nkx2.5 화GATA4 진핵표체질립이급뇌납태계동자형광표체질립적기출상,장진핵표체질립경공전염혹단전염COS7 세포,이용면역공침정기술험증Nkx2.5화GATA4 재세포내시부유상호작용,병통과형광소매분석기술분석Nkx2.5화GATA4 대뇌납태계동자서렬가능존재적협동격활작용.결과여결론:통과면역공침정실험발현GATA4 능장Nkx2.5 침정하래,상응적Nkx2.5 야능장GATA4 침정하래,설명재COS7 세포중,GATA4 능화Nkx2.5 상호작용.뇌납태계동자형광표체질립병여Nkx2.5 화GATA4 공전염COS7 세포,비기단전염Nkx2.5 혹GATA4 질립,량자공전염경능격활뇌납태계동자적표체.Nkx2.5 화GATA4 불부각자재심장발육과정중발휘중요작용,량자지간적상호협조작용대우심장적정상발육과정동양비상중요.