CAJ | 학술논문

以盐生植物盐芥为实验材料,选择经过Solexa测序筛选的盐芥tsa-miR 172a和tsa-miR 398b为目标基因,采用茎环的反转录PCR( stem-loop RT-PCR)方法分析其在盐芥根中的耐盐表达模式,以探讨盐芥miRNAs的stem-loop RT-PCR验证体系.结果显示,经过300 mmol·L-1 NaCI处理72 h后,与对照相比,盐芥根中的tsamiR172a上调表达,tsa-miR398b下调表达.用stem-loop RT-PCR方法进行tsa-miR 172a和tsa-miR398b扩增,对其电泳图进行光密度分析结果显示,盐胁迫处理与对照的比值分别为1.8和0.55,Solexa测序结果分别为2.00和0.44,说明两种方法所得结果基本一致.表明该研究建立J,盐芥miRNAs的stem- loop RT-PCR验证体系:每个miRNA设计3个引物(miRNA stem-loop引物、miRNA正向引物和miRNA通用反向引物)；扩增条件为94℃2min,94℃15s,55℃45 s,23个循环.
이염생식물염개위실험재료,선택경과Solexa측서사선적염개tsa-miR 172a화tsa-miR 398b위목표기인,채용경배적반전록PCR( stem-loop RT-PCR)방법분석기재염개근중적내염표체모식,이탐토염개miRNAs적stem-loop RT-PCR험증체계.결과현시,경과300 mmol·L-1 NaCI처리72 h후,여대조상비,염개근중적tsamiR172a상조표체,tsa-miR398b하조표체.용stem-loop RT-PCR방법진행tsa-miR 172a화tsa-miR398b확증,대기전영도진행광밀도분석결과현시,염협박처리여대조적비치분별위1.8화0.55,Solexa측서결과분별위2.00화0.44,설명량충방법소득결과기본일치.표명해연구건립J,염개miRNAs적stem- loop RT-PCR험증체계:매개miRNA설계3개인물(miRNA stem-loop인물、miRNA정향인물화miRNA통용반향인물)；확증조건위94℃2min,94℃15s,55℃45 s,23개순배.