中国组织工程研究
中國組織工程研究
중국조직공정연구
Journal of Clinical Rehabilitative Tissue Engineering Research
2012年
15期
2831-2834
,共4页
互隔交链孢酚%DNA%聚合酶β%NIH/3T3%细胞%克隆%突变%组织工程
互隔交鏈孢酚%DNA%聚閤酶β%NIH/3T3%細胞%剋隆%突變%組織工程
호격교련포분%DNA%취합매β%NIH/3T3%세포%극륭%돌변%조직공정
背景:近年来研究发现食管癌细胞中存在DNA 聚合酶β的突变.目的:观察互隔交链孢酚对NIH/3T3 细胞中DNA 聚合酶β基因序列的影响,研究互隔交链孢酚致细胞变异的机制.方法:用不同浓度(2,4,6,8 μmol/L)的互隔交链孢酚作用于NIH/3T3 细胞,并设置对照组.用RT-PCR 法从细胞总RNA中扩增出DNA 聚合酶β基因cDNA 序列,应用T-A 克隆技术,克隆至pGEM-T 载体后进行测序,分析其序列变化.结果与结论:2 μmol/L 互隔交链孢酚处理后的细胞内DNA 聚合酶β基因序列无任何变化.而4 μmol/L 组中DNA 聚合酶β基因有1 个位点发生突变,8 μmol/L 组和16 μmol/L 组中各有2 个位点发生突变,此3 组的突变存在相同的位点.结果证实,互隔交链孢酚可导致NIH/3T3 细胞中的DNA 聚合酶β发生点突变,互隔交链孢酚浓度越高,点突变的数量越多,且存在突变活跃位点.
揹景:近年來研究髮現食管癌細胞中存在DNA 聚閤酶β的突變.目的:觀察互隔交鏈孢酚對NIH/3T3 細胞中DNA 聚閤酶β基因序列的影響,研究互隔交鏈孢酚緻細胞變異的機製.方法:用不同濃度(2,4,6,8 μmol/L)的互隔交鏈孢酚作用于NIH/3T3 細胞,併設置對照組.用RT-PCR 法從細胞總RNA中擴增齣DNA 聚閤酶β基因cDNA 序列,應用T-A 剋隆技術,剋隆至pGEM-T 載體後進行測序,分析其序列變化.結果與結論:2 μmol/L 互隔交鏈孢酚處理後的細胞內DNA 聚閤酶β基因序列無任何變化.而4 μmol/L 組中DNA 聚閤酶β基因有1 箇位點髮生突變,8 μmol/L 組和16 μmol/L 組中各有2 箇位點髮生突變,此3 組的突變存在相同的位點.結果證實,互隔交鏈孢酚可導緻NIH/3T3 細胞中的DNA 聚閤酶β髮生點突變,互隔交鏈孢酚濃度越高,點突變的數量越多,且存在突變活躍位點.
배경:근년래연구발현식관암세포중존재DNA 취합매β적돌변.목적:관찰호격교련포분대NIH/3T3 세포중DNA 취합매β기인서렬적영향,연구호격교련포분치세포변이적궤제.방법:용불동농도(2,4,6,8 μmol/L)적호격교련포분작용우NIH/3T3 세포,병설치대조조.용RT-PCR 법종세포총RNA중확증출DNA 취합매β기인cDNA 서렬,응용T-A 극륭기술,극륭지pGEM-T 재체후진행측서,분석기서렬변화.결과여결론:2 μmol/L 호격교련포분처리후적세포내DNA 취합매β기인서렬무임하변화.이4 μmol/L 조중DNA 취합매β기인유1 개위점발생돌변,8 μmol/L 조화16 μmol/L 조중각유2 개위점발생돌변,차3 조적돌변존재상동적위점.결과증실,호격교련포분가도치NIH/3T3 세포중적DNA 취합매β발생점돌변,호격교련포분농도월고,점돌변적수량월다,차존재돌변활약위점.