新疆医科大学学报
新疆醫科大學學報
신강의과대학학보
JOURNAL OF XINJIANG MEDICAL UNIVERSITY
2006年
4期
292-295
,共4页
外周血%树突状细胞%粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子%白细胞介素-4%肿瘤坏死因子
外週血%樹突狀細胞%粒細胞-巨噬細胞集落刺激因子%白細胞介素-4%腫瘤壞死因子
외주혈%수돌상세포%립세포-거서세포집락자격인자%백세포개소-4%종류배사인자
目的: 建立从人外周血分离、纯化、培养树突状细胞的方法,研究细胞因子对树突状细胞体外增殖、分化成熟的影响.方法: 取正常人外周血,经淋巴细胞分离液梯度分离,取中间白膜层细胞,通过贴壁处理,获得单个核细胞,加入重组人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(rhGM-CSF)1 μg/ml和重组人白细胞介素-4(rhIL-4)410 ng/ml,体外培养7 d后,加入肿瘤坏死因子α(TNF-α)促进其分化成熟.第8天收获悬浮细胞,用相差显微镜和电镜观察其形态,经树突状细胞(DC)单克隆抗体染色后用流式细胞仪进行表型测定.结果: 从正常人外周血分离获得的单个核细胞经rhGM-CSF、rhIL-4和TNF-α联合作用1周左右获得大量高纯度树突状细胞,树突状细胞特征:悬浮生长;具有树突状或裙褶状突起;高表达HLA-DR、CD1a、CD80、CD83、CD86和低表达CD14.结论: 用rhGM-CSF、rhIL-4和TNF-α联合作用可以从人外周血诱导培养出大量的树突状细胞,经形态学观察及表型鉴定得以证实.该培养技术为进一步研究树突状细胞肿瘤疫苗的临床应用奠定了物质基础.
目的: 建立從人外週血分離、純化、培養樹突狀細胞的方法,研究細胞因子對樹突狀細胞體外增殖、分化成熟的影響.方法: 取正常人外週血,經淋巴細胞分離液梯度分離,取中間白膜層細胞,通過貼壁處理,穫得單箇覈細胞,加入重組人粒細胞-巨噬細胞集落刺激因子(rhGM-CSF)1 μg/ml和重組人白細胞介素-4(rhIL-4)410 ng/ml,體外培養7 d後,加入腫瘤壞死因子α(TNF-α)促進其分化成熟.第8天收穫懸浮細胞,用相差顯微鏡和電鏡觀察其形態,經樹突狀細胞(DC)單剋隆抗體染色後用流式細胞儀進行錶型測定.結果: 從正常人外週血分離穫得的單箇覈細胞經rhGM-CSF、rhIL-4和TNF-α聯閤作用1週左右穫得大量高純度樹突狀細胞,樹突狀細胞特徵:懸浮生長;具有樹突狀或裙褶狀突起;高錶達HLA-DR、CD1a、CD80、CD83、CD86和低錶達CD14.結論: 用rhGM-CSF、rhIL-4和TNF-α聯閤作用可以從人外週血誘導培養齣大量的樹突狀細胞,經形態學觀察及錶型鑒定得以證實.該培養技術為進一步研究樹突狀細胞腫瘤疫苗的臨床應用奠定瞭物質基礎.
목적: 건립종인외주혈분리、순화、배양수돌상세포적방법,연구세포인자대수돌상세포체외증식、분화성숙적영향.방법: 취정상인외주혈,경림파세포분리액제도분리,취중간백막층세포,통과첩벽처리,획득단개핵세포,가입중조인립세포-거서세포집락자격인자(rhGM-CSF)1 μg/ml화중조인백세포개소-4(rhIL-4)410 ng/ml,체외배양7 d후,가입종류배사인자α(TNF-α)촉진기분화성숙.제8천수획현부세포,용상차현미경화전경관찰기형태,경수돌상세포(DC)단극륭항체염색후용류식세포의진행표형측정.결과: 종정상인외주혈분리획득적단개핵세포경rhGM-CSF、rhIL-4화TNF-α연합작용1주좌우획득대량고순도수돌상세포,수돌상세포특정:현부생장;구유수돌상혹군습상돌기;고표체HLA-DR、CD1a、CD80、CD83、CD86화저표체CD14.결론: 용rhGM-CSF、rhIL-4화TNF-α연합작용가이종인외주혈유도배양출대량적수돌상세포,경형태학관찰급표형감정득이증실.해배양기술위진일보연구수돌상세포종류역묘적림상응용전정료물질기출.
