细胞与分子免疫学杂志
細胞與分子免疫學雜誌
세포여분자면역학잡지
2007年
8期
757-760
,共4页
吴鸿雅%王勤%陈永井%谢芳%毛一香%刘高勤%张学光
吳鴻雅%王勤%陳永井%謝芳%毛一香%劉高勤%張學光
오홍아%왕근%진영정%사방%모일향%류고근%장학광
OX40L%共刺激信号%杂交瘤%单克隆抗体%白血病
OX40L%共刺激信號%雜交瘤%單剋隆抗體%白血病
OX40L%공자격신호%잡교류%단극륭항체%백혈병
目的:鼠抗人OX40L分子功能性单克隆抗体(mAb)的研制及其生物学特性的鉴定.方法:以高表达人OX40L分子的基因转染细胞L929/OX40L为免疫原, 常规免疫BALB/c小鼠, 采用B淋巴细胞杂交瘤技术进行细胞融合, 经流式细胞术(FCM)分析和多次克隆化培养, 筛选出特异分泌鼠抗人OX40L分子mAb的杂交瘤细胞株;采用Western blot、 Ig亚型快速定性试纸法、染色体核型分析、竞争结合抑制试验、间接免疫荧光法和MTT增殖试验等对单抗的生物学特性进行鉴定.结果:获得2株持续、稳定分泌鼠抗人OX40LmAb的杂交瘤细胞株, 分别命名为4D6和5C2.对mAb生物学功能的研究结果表明, 2株mAb均能识别成熟DC细胞以及Jurkat、 SHI-1、 U937等白血病细胞株表面的OX40L分子.对其中SHI-1白血病细胞株增殖影响的实验显示, 这2株抗体对SHI-1的增殖都具有一定的抑制作用.结论:成功地获得了2株鼠抗人OX40L功能性mAb杂交瘤, 其所分泌的抗体能特异地识别人OX40L分子, 并影响表达OX40白血病细胞株的体外增殖, 为进一步研究OX40/OX40L的生物学功能奠定了基础.
目的:鼠抗人OX40L分子功能性單剋隆抗體(mAb)的研製及其生物學特性的鑒定.方法:以高錶達人OX40L分子的基因轉染細胞L929/OX40L為免疫原, 常規免疫BALB/c小鼠, 採用B淋巴細胞雜交瘤技術進行細胞融閤, 經流式細胞術(FCM)分析和多次剋隆化培養, 篩選齣特異分泌鼠抗人OX40L分子mAb的雜交瘤細胞株;採用Western blot、 Ig亞型快速定性試紙法、染色體覈型分析、競爭結閤抑製試驗、間接免疫熒光法和MTT增殖試驗等對單抗的生物學特性進行鑒定.結果:穫得2株持續、穩定分泌鼠抗人OX40LmAb的雜交瘤細胞株, 分彆命名為4D6和5C2.對mAb生物學功能的研究結果錶明, 2株mAb均能識彆成熟DC細胞以及Jurkat、 SHI-1、 U937等白血病細胞株錶麵的OX40L分子.對其中SHI-1白血病細胞株增殖影響的實驗顯示, 這2株抗體對SHI-1的增殖都具有一定的抑製作用.結論:成功地穫得瞭2株鼠抗人OX40L功能性mAb雜交瘤, 其所分泌的抗體能特異地識彆人OX40L分子, 併影響錶達OX40白血病細胞株的體外增殖, 為進一步研究OX40/OX40L的生物學功能奠定瞭基礎.
목적:서항인OX40L분자공능성단극륭항체(mAb)적연제급기생물학특성적감정.방법:이고표체인OX40L분자적기인전염세포L929/OX40L위면역원, 상규면역BALB/c소서, 채용B림파세포잡교류기술진행세포융합, 경류식세포술(FCM)분석화다차극륭화배양, 사선출특이분비서항인OX40L분자mAb적잡교류세포주;채용Western blot、 Ig아형쾌속정성시지법、염색체핵형분석、경쟁결합억제시험、간접면역형광법화MTT증식시험등대단항적생물학특성진행감정.결과:획득2주지속、은정분비서항인OX40LmAb적잡교류세포주, 분별명명위4D6화5C2.대mAb생물학공능적연구결과표명, 2주mAb균능식별성숙DC세포이급Jurkat、 SHI-1、 U937등백혈병세포주표면적OX40L분자.대기중SHI-1백혈병세포주증식영향적실험현시, 저2주항체대SHI-1적증식도구유일정적억제작용.결론:성공지획득료2주서항인OX40L공능성mAb잡교류, 기소분비적항체능특이지식별인OX40L분자, 병영향표체OX40백혈병세포주적체외증식, 위진일보연구OX40/OX40L적생물학공능전정료기출.
