林业科学研究
林業科學研究
임업과학연구
FOREST RESEARCH
2007年
6期
739-743
,共5页
云南红豆杉%简并锚定微卫星-PCR%反应体系%交互正交设计
雲南紅豆杉%簡併錨定微衛星-PCR%反應體繫%交互正交設計
운남홍두삼%간병묘정미위성-PCR%반응체계%교호정교설계
采用交互正交设计L64(421)对濒危植物云南红豆杉简并锚定微卫星-PCR反应体系分别进行了5因素(Taq酶;Mg2+;dNTP;DNA及引物)4水平的优化筛选,SAS软件统计分析表明:3个单因素(Taq酶;Mg2+;dNTP)和2个交互作用(Taq×Mg2+,Mg2+×dNTP)对此反应体系有显著影响作用.云南红豆杉简并锚定微卫星-PCR反应的优化体系是:在20μL反应体系中含有1×PCR buffer,Taq酶4 U,Mg2+(2.0 mmol·L-1),dNTP(0.4 mmol·L-1),DNA 75 ng,引物(1.0 μmol·L-1),退火温度(54℃).交互正交设计既能快捷有效地筛选出最佳PCR反应体系,又能揭示试验因素及其交互作用对扩增的影响程度,分析结果更客观、准确,具有一定的应用价值.
採用交互正交設計L64(421)對瀕危植物雲南紅豆杉簡併錨定微衛星-PCR反應體繫分彆進行瞭5因素(Taq酶;Mg2+;dNTP;DNA及引物)4水平的優化篩選,SAS軟件統計分析錶明:3箇單因素(Taq酶;Mg2+;dNTP)和2箇交互作用(Taq×Mg2+,Mg2+×dNTP)對此反應體繫有顯著影響作用.雲南紅豆杉簡併錨定微衛星-PCR反應的優化體繫是:在20μL反應體繫中含有1×PCR buffer,Taq酶4 U,Mg2+(2.0 mmol·L-1),dNTP(0.4 mmol·L-1),DNA 75 ng,引物(1.0 μmol·L-1),退火溫度(54℃).交互正交設計既能快捷有效地篩選齣最佳PCR反應體繫,又能揭示試驗因素及其交互作用對擴增的影響程度,分析結果更客觀、準確,具有一定的應用價值.
채용교호정교설계L64(421)대빈위식물운남홍두삼간병묘정미위성-PCR반응체계분별진행료5인소(Taq매;Mg2+;dNTP;DNA급인물)4수평적우화사선,SAS연건통계분석표명:3개단인소(Taq매;Mg2+;dNTP)화2개교호작용(Taq×Mg2+,Mg2+×dNTP)대차반응체계유현저영향작용.운남홍두삼간병묘정미위성-PCR반응적우화체계시:재20μL반응체계중함유1×PCR buffer,Taq매4 U,Mg2+(2.0 mmol·L-1),dNTP(0.4 mmol·L-1),DNA 75 ng,인물(1.0 μmol·L-1),퇴화온도(54℃).교호정교설계기능쾌첩유효지사선출최가PCR반응체계,우능게시시험인소급기교호작용대확증적영향정도,분석결과경객관、준학,구유일정적응용개치.
