HPV16,18,58-mE67重组腺病毒的构建及克隆表达
HPV16,18,58-mE67중조선병독적구건급극륭표체
Construction and expression of a recombinant adenovirus encoding E6-E7 fusion proteins of hmnan papillomavirus subtypes 16, 18, and 58
  • 万方数据
    免疫学杂志 면역학잡지
    IMMUNOLOGICAL JOURNAL
    2008年 4期 459-463 ,共5页

    杨峥嵘%马原栋%万骏%郑义%王海峰%赵洁%彭扬洋%罗海波%羊东晔%黄来强

    양쟁영%마원동%만준%정의%왕해봉%조길%팽양양%라해파%양동엽%황래강

    人乳头瘤病毒%腺病毒%转化活性 人乳頭瘤病毒%腺病毒%轉化活性
    인유두류병독%선병독%전화활성
    目的 构建能同时表达HPV16,18,58三亚型E6-E7优化融合基因的重组腺病毒,为下一步获得适合国情的宫颈癌HPV三价治疗性候选疫苗打基础.方法 常规扩增、构建HPV16,18,58的E6-E7融合基因,PCR定点突变消除其转化活性后以IRES相连并重组入pAdeno-X腺病毒载体系统;体外细胞、软琼脂培养及裸鼠成瘤实验检测突变基因转化活性去除情况;重组腺病毒电击转染293包装细胞,Western blot分析外源基因表达情况.结果 三型重组融合基因序列与设计完全一致,其中突变基因的转化活性显著降低,Western blot等显示所构建重组腺病毒在293细胞中高效表达外源基因.结论 成功构建表达HPV16,18,58三型E6-E7融合基因的重组腺病毒,并有效消除了其转化活性,为下一步疫苗研发打下了基础.
    목적 구건능동시표체HPV16,18,58삼아형E6-E7우화융합기인적중조선병독,위하일보획득괄합국정적궁경암HPV삼개치료성후선역묘타기출.방법 상규확증、구건HPV16,18,58적E6-E7융합기인,PCR정점돌변소제기전화활성후이IRES상련병중조입pAdeno-X선병독재체계통;체외세포、연경지배양급라서성류실험검측돌변기인전화활성거제정황;중조선병독전격전염293포장세포,Western blot분석외원기인표체정황.결과 삼형중조융합기인서렬여설계완전일치,기중돌변기인적전화활성현저강저,Western blot등현시소구건중조선병독재293세포중고효표체외원기인.결론 성공구건표체HPV16,18,58삼형E6-E7융합기인적중조선병독,병유효소제료기전화활성,위하일보역묘연발타하료기출.
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