中国林蛙抗菌肽基因在毕赤酵母中的表达及其活性检测
중국림와항균태기인재필적효모중적표체급기활성검측
Cloning and expression of antimicrobial peptide gene from Rana chensinensis in Pichia pastoris
  • 万方数据
    中国兽医学报 중국수의학보
    CHINESE JOURNAL OF VETERINARY SCIENCE
    2008年 6期 663-666,671 ,共5页

    乔红伟%韩俊友%赵瑞利%胡博%谢芳%郑伟%雷连成%江利娜%韩文瑜

    교홍위%한준우%조서리%호박%사방%정위%뢰련성%강리나%한문유

    中国林蛙%抗菌肽%酵母表达%抑菌活性 中國林蛙%抗菌肽%酵母錶達%抑菌活性
    중국림와%항균태%효모표체%억균활성
    将中国林蛙皮肤抗菌肤基因(RC)克隆到毕赤酵母表达载体pPIC9K上,使之准确融合于a交配因子分泌信号,然后通过电击转化毕赤酵母宿主菌GS115/His,构建pPIC9K/RC.将筛选出的高效表达的重组转化子用甲醇作诱导剂进行小瓶发酵,28～30℃诱导后,经Tricine SDS-PAGE检测,表达产物在a信号因子引导下分泌到培养基中.分泌到培养基中的表达产物能够抑杀细菌和抑制肿瘤细胞生长.对酵母重组子用酵母染色体DNA的通用引物和目的片段的引物进行PCR扩增.结果表明,中国林蛙皮肤抗菌肤基因能以单拷贝整合到毕赤酵母染色体基因组中并形成转录产物.
    장중국림와피부항균부기인(RC)극륭도필적효모표체재체pPIC9K상,사지준학융합우a교배인자분비신호,연후통과전격전화필적효모숙주균GS115/His,구건pPIC9K/RC.장사선출적고효표체적중조전화자용갑순작유도제진행소병발효,28～30℃유도후,경Tricine SDS-PAGE검측,표체산물재a신호인자인도하분비도배양기중.분비도배양기중적표체산물능구억살세균화억제종류세포생장.대효모중조자용효모염색체DNA적통용인물화목적편단적인물진행PCR확증.결과표명,중국림와피부항균부기인능이단고패정합도필적효모염색체기인조중병형성전록산물.
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