西北农业学报
西北農業學報
서북농업학보
ACTA AGRICULTURAE BOREALI-OCCIDENTALIS SINICA
2009年
1期
20-23
,共4页
史芳芳%王亮%吕自力%王安江
史芳芳%王亮%呂自力%王安江
사방방%왕량%려자력%왕안강
牛乳铁多肽(LfcinB)%毕赤酵母表达系统%抗菌活性
牛乳鐵多肽(LfcinB)%畢赤酵母錶達繫統%抗菌活性
우유철다태(LfcinB)%필적효모표체계통%항균활성
用化学合成法合成了以酵母偏爱密码子编码的抗菌肽LfcinB基因片段.合成片段与酵母表达载体DPICZα A重组,构建胞外分泌表达载体pPICZα A-LfcinB,通过限制性内切酶Sac Ⅰ酶切线性化,电击法转化毕赤酵母X-33宿主菌,Zeocin抗性筛选,经PCR检测LfcinB基因与毕赤酵母染色体稳定整合.阳性克隆经甲醇诱导表达LfcinB,诱导表达6 d,每24 h取上清1 mL,进行抑菌试验.结果表明,抗菌肽牛乳铁多肽基因已整合剑酵母细胞基因组中并获得表达,经0.5%甲醇在30℃诱导48 h可产生较高抗菌活性的抗菌肽,表达产物具有较强杀菌作用.
用化學閤成法閤成瞭以酵母偏愛密碼子編碼的抗菌肽LfcinB基因片段.閤成片段與酵母錶達載體DPICZα A重組,構建胞外分泌錶達載體pPICZα A-LfcinB,通過限製性內切酶Sac Ⅰ酶切線性化,電擊法轉化畢赤酵母X-33宿主菌,Zeocin抗性篩選,經PCR檢測LfcinB基因與畢赤酵母染色體穩定整閤.暘性剋隆經甲醇誘導錶達LfcinB,誘導錶達6 d,每24 h取上清1 mL,進行抑菌試驗.結果錶明,抗菌肽牛乳鐵多肽基因已整閤劍酵母細胞基因組中併穫得錶達,經0.5%甲醇在30℃誘導48 h可產生較高抗菌活性的抗菌肽,錶達產物具有較彊殺菌作用.
용화학합성법합성료이효모편애밀마자편마적항균태LfcinB기인편단.합성편단여효모표체재체DPICZα A중조,구건포외분비표체재체pPICZα A-LfcinB,통과한제성내절매Sac Ⅰ매절선성화,전격법전화필적효모X-33숙주균,Zeocin항성사선,경PCR검측LfcinB기인여필적효모염색체은정정합.양성극륭경갑순유도표체LfcinB,유도표체6 d,매24 h취상청1 mL,진행억균시험.결과표명,항균태우유철다태기인이정합검효모세포기인조중병획득표체,경0.5%갑순재30℃유도48 h가산생교고항균활성적항균태,표체산물구유교강살균작용.
