江西科学
江西科學
강서과학
JIANGXI SCIENCE
2011年
1期
47-50,108
,共5页
黄晓萍%郭建军%范汉东%杨一兵
黃曉萍%郭建軍%範漢東%楊一兵
황효평%곽건군%범한동%양일병
白细胞介素24%双杂交系统技术%自激活作用
白細胞介素24%雙雜交繫統技術%自激活作用
백세포개소24%쌍잡교계통기술%자격활작용
构建人白细胞介素24蛋白酵母双杂交诱饵栽体,并检测其自激活作用.采用PCR技术特异性扩增人白细胞介素24基因IL-24,将其克隆入酵母双杂交诱饵质粒pGBKT7中,通过PCR扩增、限制性酶切鉴定及序列测定,获得质粒pGBKT7-IL-24.采用PEG/LiAc法将其转入酵母AH109中,经表型筛选检测其自激活作用,同时利用对照质粒组筛选组氨酸(His)本底表达抑制荆3-AT的合适工作浓度.结果获得了无自激活作用的诱饵载体pGBKT7-IL-24.确定了组氨酸(His)本底表达抑制剂3-AT的最佳工作浓度.结论:诱饵质粒pcBKT7-IL-24可以用于酵母双杂交实验,为进一步运用酵母双杂交技术在人类组织cDNA文库中筛选与之相互作用的蛋白奠定了基础.
構建人白細胞介素24蛋白酵母雙雜交誘餌栽體,併檢測其自激活作用.採用PCR技術特異性擴增人白細胞介素24基因IL-24,將其剋隆入酵母雙雜交誘餌質粒pGBKT7中,通過PCR擴增、限製性酶切鑒定及序列測定,穫得質粒pGBKT7-IL-24.採用PEG/LiAc法將其轉入酵母AH109中,經錶型篩選檢測其自激活作用,同時利用對照質粒組篩選組氨痠(His)本底錶達抑製荊3-AT的閤適工作濃度.結果穫得瞭無自激活作用的誘餌載體pGBKT7-IL-24.確定瞭組氨痠(His)本底錶達抑製劑3-AT的最佳工作濃度.結論:誘餌質粒pcBKT7-IL-24可以用于酵母雙雜交實驗,為進一步運用酵母雙雜交技術在人類組織cDNA文庫中篩選與之相互作用的蛋白奠定瞭基礎.
구건인백세포개소24단백효모쌍잡교유이재체,병검측기자격활작용.채용PCR기술특이성확증인백세포개소24기인IL-24,장기극륭입효모쌍잡교유이질립pGBKT7중,통과PCR확증、한제성매절감정급서렬측정,획득질립pGBKT7-IL-24.채용PEG/LiAc법장기전입효모AH109중,경표형사선검측기자격활작용,동시이용대조질립조사선조안산(His)본저표체억제형3-AT적합괄공작농도.결과획득료무자격활작용적유이재체pGBKT7-IL-24.학정료조안산(His)본저표체억제제3-AT적최가공작농도.결론:유이질립pcBKT7-IL-24가이용우효모쌍잡교실험,위진일보운용효모쌍잡교기술재인류조직cDNA문고중사선여지상호작용적단백전정료기출.
