医学研究杂志
醫學研究雜誌
의학연구잡지
JOURNAL OF MEDICAL RESEARCH
2012年
1期
47-50
,共4页
王岚%崔迎彬%马晓骊%陈虹%王欣%黄秉仁
王嵐%崔迎彬%馬曉驪%陳虹%王訢%黃秉仁
왕람%최영빈%마효려%진홍%왕흔%황병인
TrkA%snapin%激光扫描共聚焦%荧光共振能量转移%蛋白质相互作用
TrkA%snapin%激光掃描共聚焦%熒光共振能量轉移%蛋白質相互作用
TrkA%snapin%격광소묘공취초%형광공진능량전이%단백질상호작용
目的 确认TrkA与snapin蛋白间的直接相互作用.方法 采用DNA重组技术,构建增强型荧光蛋白表达载体pECFP - TrkAICD(TrkA膜内区)和pEYFP - snapin,共转染HEK 293T细胞后以激光扫描共聚焦显微镜观察并进行荧光共振能量转移(fluorescence resonance energy transfer,FRET)分析.结果 成功构建了snapin和TrkA的重组质粒,共转染细胞后激光扫描共聚焦显微镜分析表明两种蛋白分布在细胞质同一层面,荧光共振能量转移(FRET)分析表明能量转移效率＞5％,与对照相比有显著区别(P＜0.05).结论 激光扫描共聚焦及FRET实验结果都证明了TrkA膜内区与snapin两个蛋白之间存在着直接的相互作用.
目的 確認TrkA與snapin蛋白間的直接相互作用.方法 採用DNA重組技術,構建增彊型熒光蛋白錶達載體pECFP - TrkAICD(TrkA膜內區)和pEYFP - snapin,共轉染HEK 293T細胞後以激光掃描共聚焦顯微鏡觀察併進行熒光共振能量轉移(fluorescence resonance energy transfer,FRET)分析.結果 成功構建瞭snapin和TrkA的重組質粒,共轉染細胞後激光掃描共聚焦顯微鏡分析錶明兩種蛋白分佈在細胞質同一層麵,熒光共振能量轉移(FRET)分析錶明能量轉移效率＞5％,與對照相比有顯著區彆(P＜0.05).結論 激光掃描共聚焦及FRET實驗結果都證明瞭TrkA膜內區與snapin兩箇蛋白之間存在著直接的相互作用.
목적 학인TrkA여snapin단백간적직접상호작용.방법 채용DNA중조기술,구건증강형형광단백표체재체pECFP - TrkAICD(TrkA막내구)화pEYFP - snapin,공전염HEK 293T세포후이격광소묘공취초현미경관찰병진행형광공진능량전이(fluorescence resonance energy transfer,FRET)분석.결과 성공구건료snapin화TrkA적중조질립,공전염세포후격광소묘공취초현미경분석표명량충단백분포재세포질동일층면,형광공진능량전이(FRET)분석표명능량전이효솔＞5％,여대조상비유현저구별(P＜0.05).결론 격광소묘공취초급FRET실험결과도증명료TrkA막내구여snapin량개단백지간존재착직접적상호작용.
