生物技术通讯
生物技術通訊
생물기술통신
LETTERS IN BIOTECHNOLOGY
2012年
3期
347-351
,共5页
罗维%林宇翔%绳纪坡%于芳%柯波%胡宝成
囉維%林宇翔%繩紀坡%于芳%柯波%鬍寶成
라유%림우상%승기파%우방%가파%호보성
细胞外基质磷酸糖蛋白%微小RNA%靶向
細胞外基質燐痠糖蛋白%微小RNA%靶嚮
세포외기질린산당단백%미소RNA%파향
目的:寻找靶向细胞外基质磷酸糖蛋白(MEPE)基因的微小RNA( miRNA),并检测其对人HeLa细胞内源性Mepe基因表达的影响.方法:通过NCBI检索人源Mepe的3'UTR,利用miRNA预测工具TargetScan预测可能靶向Mepe的所有miRNA,通过双萤光素酶报告基因系统检测miRNA与Mepe 3'UTR的结合情况,从而初步筛选出可能靶向Mepe的miRNA;同时,用Western印迹检测miRNA经转染后对Mepe基因表达的影响.结果:利用TargetScan预测出36条可能靶向Mepe的miRNA,根据分值及匹配情况从中挑选出6条进行验证；与转染空载体pGL3 -cm的相对荧光素值相比,转染miR-376a的相对荧光素值降低较为明显,而当Mepe 3'UTR与miR-376a结合位点突变后,miR-376a不能抑制萤光素酶的活性；Western印迹结果显示miR-376a能明显抑制MEPE的表达.结论:miRNA-376a可能是靶向Mepe基因的miRNA,为进一步研究MEPE的功能奠定了基础.
目的:尋找靶嚮細胞外基質燐痠糖蛋白(MEPE)基因的微小RNA( miRNA),併檢測其對人HeLa細胞內源性Mepe基因錶達的影響.方法:通過NCBI檢索人源Mepe的3'UTR,利用miRNA預測工具TargetScan預測可能靶嚮Mepe的所有miRNA,通過雙螢光素酶報告基因繫統檢測miRNA與Mepe 3'UTR的結閤情況,從而初步篩選齣可能靶嚮Mepe的miRNA;同時,用Western印跡檢測miRNA經轉染後對Mepe基因錶達的影響.結果:利用TargetScan預測齣36條可能靶嚮Mepe的miRNA,根據分值及匹配情況從中挑選齣6條進行驗證；與轉染空載體pGL3 -cm的相對熒光素值相比,轉染miR-376a的相對熒光素值降低較為明顯,而噹Mepe 3'UTR與miR-376a結閤位點突變後,miR-376a不能抑製螢光素酶的活性；Western印跡結果顯示miR-376a能明顯抑製MEPE的錶達.結論:miRNA-376a可能是靶嚮Mepe基因的miRNA,為進一步研究MEPE的功能奠定瞭基礎.
목적:심조파향세포외기질린산당단백(MEPE)기인적미소RNA( miRNA),병검측기대인HeLa세포내원성Mepe기인표체적영향.방법:통과NCBI검색인원Mepe적3'UTR,이용miRNA예측공구TargetScan예측가능파향Mepe적소유miRNA,통과쌍형광소매보고기인계통검측miRNA여Mepe 3'UTR적결합정황,종이초보사선출가능파향Mepe적miRNA;동시,용Western인적검측miRNA경전염후대Mepe기인표체적영향.결과:이용TargetScan예측출36조가능파향Mepe적miRNA,근거분치급필배정황종중도선출6조진행험증；여전염공재체pGL3 -cm적상대형광소치상비,전염miR-376a적상대형광소치강저교위명현,이당Mepe 3'UTR여miR-376a결합위점돌변후,miR-376a불능억제형광소매적활성；Western인적결과현시miR-376a능명현억제MEPE적표체.결론:miRNA-376a가능시파향Mepe기인적miRNA,위진일보연구MEPE적공능전정료기출.
