微生物学杂志
微生物學雜誌
미생물학잡지
JOURNAL OF MICROBIOLOGY
2006年
5期
44-48
,共5页
李利%金立杰%杨屹%邵丽军%谷丽娟%刘岩松%董厉子%王宇
李利%金立傑%楊屹%邵麗軍%穀麗娟%劉巖鬆%董厲子%王宇
리리%금립걸%양흘%소려군%곡려연%류암송%동려자%왕우
PreS2基因%S基因%毕赤酵母%表达
PreS2基因%S基因%畢赤酵母%錶達
PreS2기인%S기인%필적효모%표체
构建重组质粒PHIL-D2/PreS2S以研究乙肝病毒PreS2(120-146)S基因编码蛋白在毕赤酵母中的表达.通过PCR扩增获得PreS2S片段,插入含AOX1启动子的Pichia Pastoris表达载体PHIL-D2中,构建重组表达质粒PHIL-D2/PreS2S,转化酵母宿主菌GS115.挑取阳性克隆摇床培养,甲醇诱导表达.通过ELISA、RPHA鉴定表达产物.成功构建了PHIL-D2/PreS2S真核表达载体,经过序列分析,插入的基因为在中国流行的adr亚型.在毕赤酵母中重组载体表达了S蛋白,S蛋白的表达量为 34.9 mg/L,PreS2抗原检测为强阳性.利用毕赤酵母表达系统能够有效地表达乙型肝炎病毒的PreS2S蛋白,PreS2S蛋白具有良好的生物学活性.
構建重組質粒PHIL-D2/PreS2S以研究乙肝病毒PreS2(120-146)S基因編碼蛋白在畢赤酵母中的錶達.通過PCR擴增穫得PreS2S片段,插入含AOX1啟動子的Pichia Pastoris錶達載體PHIL-D2中,構建重組錶達質粒PHIL-D2/PreS2S,轉化酵母宿主菌GS115.挑取暘性剋隆搖床培養,甲醇誘導錶達.通過ELISA、RPHA鑒定錶達產物.成功構建瞭PHIL-D2/PreS2S真覈錶達載體,經過序列分析,插入的基因為在中國流行的adr亞型.在畢赤酵母中重組載體錶達瞭S蛋白,S蛋白的錶達量為 34.9 mg/L,PreS2抗原檢測為彊暘性.利用畢赤酵母錶達繫統能夠有效地錶達乙型肝炎病毒的PreS2S蛋白,PreS2S蛋白具有良好的生物學活性.
구건중조질립PHIL-D2/PreS2S이연구을간병독PreS2(120-146)S기인편마단백재필적효모중적표체.통과PCR확증획득PreS2S편단,삽입함AOX1계동자적Pichia Pastoris표체재체PHIL-D2중,구건중조표체질립PHIL-D2/PreS2S,전화효모숙주균GS115.도취양성극륭요상배양,갑순유도표체.통과ELISA、RPHA감정표체산물.성공구건료PHIL-D2/PreS2S진핵표체재체,경과서렬분석,삽입적기인위재중국류행적adr아형.재필적효모중중조재체표체료S단백,S단백적표체량위 34.9 mg/L,PreS2항원검측위강양성.이용필적효모표체계통능구유효지표체을형간염병독적PreS2S단백,PreS2S단백구유량호적생물학활성.
