生物技术通讯
生物技術通訊
생물기술통신
LETTERS IN BIOTECHNOLOGY
2008年
2期
240-243
,共4页
夏涛%朱路%龙全科%鲁明波%余龙江
夏濤%硃路%龍全科%魯明波%餘龍江
하도%주로%룡전과%로명파%여룡강
日本血吸虫%sjFABP%SjGST%原核表达%DNA疫苗
日本血吸蟲%sjFABP%SjGST%原覈錶達%DNA疫苗
일본혈흡충%sjFABP%SjGST%원핵표체%DNA역묘
目的:以日本血吸虫基因SjFABP和SjGST原核表达产物检测二价DNA疫苗pVIVO2-SjFABP-SjGST在体内诱发的特异性抗体.方法:克隆日本血吸虫抗原基因SjFABP和SjGST,构建重组原核表达载体pET30a-SjFABP、pET30a-SjGST及真核表达载体pVIVO2-SjFABP-SjGST;将pET30a-SjFABP和pET30a-SjGST进行原核表达,并将表达产物用镍亲和柱分离纯化;采用Western印迹对日本血吸虫DNA疫苗pVIVO2-SjFABP-SjGST免疫4周后的BALB/c小鼠血清进行特异性抗体检测.结果:克隆了日本血吸虫抗原基因SjFABP(399 bp)和SjGST(657 bp),并构建了pET30a-SjFABP、pET30a-SjGST及pVIVO2-SjFABP-SjGST重组质粒;经Western印迹检测,pET30a-SjFABP及pET30a-SjGST原核表达的抗原蛋白均能够与经日本血吸虫二价DNA疫苗pVIVO2-SjFABP-SjGST免疫的小鼠的血清产生特异性免疫反应.结论:日本血吸虫SjFABP和SjGST基因的原核表达系统成功建立;原核表达的抗原蛋白具有免疫原性;以原核表达产物可检测日本血吸虫DNA疫苗pVIVO2-SjFABP-SjGST在体内诱发的特异性抗体.
目的:以日本血吸蟲基因SjFABP和SjGST原覈錶達產物檢測二價DNA疫苗pVIVO2-SjFABP-SjGST在體內誘髮的特異性抗體.方法:剋隆日本血吸蟲抗原基因SjFABP和SjGST,構建重組原覈錶達載體pET30a-SjFABP、pET30a-SjGST及真覈錶達載體pVIVO2-SjFABP-SjGST;將pET30a-SjFABP和pET30a-SjGST進行原覈錶達,併將錶達產物用鎳親和柱分離純化;採用Western印跡對日本血吸蟲DNA疫苗pVIVO2-SjFABP-SjGST免疫4週後的BALB/c小鼠血清進行特異性抗體檢測.結果:剋隆瞭日本血吸蟲抗原基因SjFABP(399 bp)和SjGST(657 bp),併構建瞭pET30a-SjFABP、pET30a-SjGST及pVIVO2-SjFABP-SjGST重組質粒;經Western印跡檢測,pET30a-SjFABP及pET30a-SjGST原覈錶達的抗原蛋白均能夠與經日本血吸蟲二價DNA疫苗pVIVO2-SjFABP-SjGST免疫的小鼠的血清產生特異性免疫反應.結論:日本血吸蟲SjFABP和SjGST基因的原覈錶達繫統成功建立;原覈錶達的抗原蛋白具有免疫原性;以原覈錶達產物可檢測日本血吸蟲DNA疫苗pVIVO2-SjFABP-SjGST在體內誘髮的特異性抗體.
목적:이일본혈흡충기인SjFABP화SjGST원핵표체산물검측이개DNA역묘pVIVO2-SjFABP-SjGST재체내유발적특이성항체.방법:극륭일본혈흡충항원기인SjFABP화SjGST,구건중조원핵표체재체pET30a-SjFABP、pET30a-SjGST급진핵표체재체pVIVO2-SjFABP-SjGST;장pET30a-SjFABP화pET30a-SjGST진행원핵표체,병장표체산물용얼친화주분리순화;채용Western인적대일본혈흡충DNA역묘pVIVO2-SjFABP-SjGST면역4주후적BALB/c소서혈청진행특이성항체검측.결과:극륭료일본혈흡충항원기인SjFABP(399 bp)화SjGST(657 bp),병구건료pET30a-SjFABP、pET30a-SjGST급pVIVO2-SjFABP-SjGST중조질립;경Western인적검측,pET30a-SjFABP급pET30a-SjGST원핵표체적항원단백균능구여경일본혈흡충이개DNA역묘pVIVO2-SjFABP-SjGST면역적소서적혈청산생특이성면역반응.결론:일본혈흡충SjFABP화SjGST기인적원핵표체계통성공건립;원핵표체적항원단백구유면역원성;이원핵표체산물가검측일본혈흡충DNA역묘pVIVO2-SjFABP-SjGST재체내유발적특이성항체.
