上海交通大学学报（医学版）
上海交通大學學報（醫學版）
상해교통대학학보（의학판）
JOURNAL OF SHANGHAI JIAOTONG UNIVERSITY(MEDICAL SCIENCE)
2008年
9期
1198-1201
,共4页
朱理安%方宁远%高平进%金贤%汪海娅
硃理安%方寧遠%高平進%金賢%汪海婭
주리안%방저원%고평진%금현%왕해아
蛋白转导序列%α-烯醇化酶%心肌细胞
蛋白轉導序列%α-烯醇化酶%心肌細胞
단백전도서렬%α-희순화매%심기세포
目的 探讨将外源α-烯醇化酶导入心肌细胞的可行性,为后续的蛋白功能研究奠定基础.方法 原代培养WKY乳鼠心肌细胞,将纯化的α-烯醇化酶与蛋白转导载体Charoit共孵育后转染心肌细胞,同时设置阳性对照β-半乳糖苷酶转染组,光镜下计数转染阳性细胞的百分率;蛋白免疫印迹检测细胞总蛋白中α-烯醇化酶的表达;荧光共聚焦显微镜下观察α-烯醇化酶的亚细胞定位.结果 Charoit能够将外源蛋白成功导入原代培养的心肌细胞中,光镜下可见β-半乳糖苷酶的导入效率约为81%,Western blot结果表明外源α-烯醇化酶成功导入了心肌细胞,免疫荧光显示导入的外源α-烯醇化酶与内源α-烯醇化酶相似,主要定位于胞浆.结论 利用Charoit介导的蛋白转导技术能够成功将外源α-烯醇化酶导入心肌细胞.
目的 探討將外源α-烯醇化酶導入心肌細胞的可行性,為後續的蛋白功能研究奠定基礎.方法 原代培養WKY乳鼠心肌細胞,將純化的α-烯醇化酶與蛋白轉導載體Charoit共孵育後轉染心肌細胞,同時設置暘性對照β-半乳糖苷酶轉染組,光鏡下計數轉染暘性細胞的百分率;蛋白免疫印跡檢測細胞總蛋白中α-烯醇化酶的錶達;熒光共聚焦顯微鏡下觀察α-烯醇化酶的亞細胞定位.結果 Charoit能夠將外源蛋白成功導入原代培養的心肌細胞中,光鏡下可見β-半乳糖苷酶的導入效率約為81%,Western blot結果錶明外源α-烯醇化酶成功導入瞭心肌細胞,免疫熒光顯示導入的外源α-烯醇化酶與內源α-烯醇化酶相似,主要定位于胞漿.結論 利用Charoit介導的蛋白轉導技術能夠成功將外源α-烯醇化酶導入心肌細胞.
목적 탐토장외원α-희순화매도입심기세포적가행성,위후속적단백공능연구전정기출.방법 원대배양WKY유서심기세포,장순화적α-희순화매여단백전도재체Charoit공부육후전염심기세포,동시설치양성대조β-반유당감매전염조,광경하계수전염양성세포적백분솔;단백면역인적검측세포총단백중α-희순화매적표체;형광공취초현미경하관찰α-희순화매적아세포정위.결과 Charoit능구장외원단백성공도입원대배양적심기세포중,광경하가견β-반유당감매적도입효솔약위81%,Western blot결과표명외원α-희순화매성공도입료심기세포,면역형광현시도입적외원α-희순화매여내원α-희순화매상사,주요정위우포장.결론 이용Charoit개도적단백전도기술능구성공장외원α-희순화매도입심기세포.
