安徽农业科学
安徽農業科學
안휘농업과학
JOURNAL OF ANHUI AGRICULTURAL SCIENCES
2010年
26期
14455-14456
,共2页
张蕾%李鹏飞%李伟伟%马鸣潇
張蕾%李鵬飛%李偉偉%馬鳴瀟
장뢰%리붕비%리위위%마명소
猪IFN-α基因%毕赤酵母%真核表达%活性检测
豬IFN-α基因%畢赤酵母%真覈錶達%活性檢測
저IFN-α기인%필적효모%진핵표체%활성검측
[目的]检测克隆猪α干扰素基因(IFN-α基因)在毕赤酵母中的表达.[方法]经植物血凝素(PHA)诱导后,提取猪外周血淋巴细胞, 并用RT-PCR方法获得IFN-α基因,将该基因与真核表达质粒pPIC9K连接,并电转入毕赤酵母GS115菌中,经甲醇诱导表达后,SDS-PAGE电泳检测IFN-α蛋白表达, Western-blot分析IFN-α蛋白活性.[结果]重组转化菌株经甲醇诱导后能表达相对分子质量约为19 kD的蛋白质,该蛋白质能与相应抗体产生免疫反应.[结论]实现了猪功能性IFN-α基因表在毕赤酵母中表达,为进一步探讨IFN-α的生物学活性研究奠定了基础.
[目的]檢測剋隆豬α榦擾素基因(IFN-α基因)在畢赤酵母中的錶達.[方法]經植物血凝素(PHA)誘導後,提取豬外週血淋巴細胞, 併用RT-PCR方法穫得IFN-α基因,將該基因與真覈錶達質粒pPIC9K連接,併電轉入畢赤酵母GS115菌中,經甲醇誘導錶達後,SDS-PAGE電泳檢測IFN-α蛋白錶達, Western-blot分析IFN-α蛋白活性.[結果]重組轉化菌株經甲醇誘導後能錶達相對分子質量約為19 kD的蛋白質,該蛋白質能與相應抗體產生免疫反應.[結論]實現瞭豬功能性IFN-α基因錶在畢赤酵母中錶達,為進一步探討IFN-α的生物學活性研究奠定瞭基礎.
[목적]검측극륭저α간우소기인(IFN-α기인)재필적효모중적표체.[방법]경식물혈응소(PHA)유도후,제취저외주혈림파세포, 병용RT-PCR방법획득IFN-α기인,장해기인여진핵표체질립pPIC9K련접,병전전입필적효모GS115균중,경갑순유도표체후,SDS-PAGE전영검측IFN-α단백표체, Western-blot분석IFN-α단백활성.[결과]중조전화균주경갑순유도후능표체상대분자질량약위19 kD적단백질,해단백질능여상응항체산생면역반응.[결론]실현료저공능성IFN-α기인표재필적효모중표체,위진일보탐토IFN-α적생물학활성연구전정료기출.
