重庆医学
重慶醫學
중경의학
CHONGQING MEDICAL JOURNAL
2011年
14期
1379-1381
,共3页
RNA,小分子干扰%乳腺肿瘤%kallikrein6
RNA,小分子榦擾%乳腺腫瘤%kallikrein6
RNA,소분자간우%유선종류%kallikrein6
目的 探讨siRNA沉默KLK6基因表达对乳腺癌细胞生长的抑制作用及其机制,为乳腺癌的基因诊断和治疗提供理论依据.方法 针对KLK6 mRNA 序列设计合成siRNA,构建2个重组质粒PGCsilencerTMH1/GFP/Neo/KLK6和PGCsilencerTMH1/GFP/Neo/Non;将重组质粒导入乳腺癌MCF-7细胞株,G418筛选获得稳定转染的细胞株;实验分为脂质体对照、阴性质粒转染对照及KLK6 siRNA 重组质粒转染组,实时荧光定量PCR 法检测KLK6 mRNA 的表达的变化,用四甲基偶氮唑盐(MTT)法测量细胞生长情况.结果 测序证实表达载体构建成功,在稳定转染重组质粒PGCsilencerTMH1/GFP/Neo/KLK6的乳腺癌MCF-7细胞株中,KLK6 mRNA抑制率(76%)明显高于阴性质粒对照组(2.7%),MCF-7细胞增殖活性显著低于阴性对照组和脂质体对照组.结论 重组质粒PGCsilencerTMH1/GFP/Neo/KLK6可抑制乳腺癌细胞中KLK6基因的表达,并抑制乳腺癌细胞的生长.
目的 探討siRNA沉默KLK6基因錶達對乳腺癌細胞生長的抑製作用及其機製,為乳腺癌的基因診斷和治療提供理論依據.方法 針對KLK6 mRNA 序列設計閤成siRNA,構建2箇重組質粒PGCsilencerTMH1/GFP/Neo/KLK6和PGCsilencerTMH1/GFP/Neo/Non;將重組質粒導入乳腺癌MCF-7細胞株,G418篩選穫得穩定轉染的細胞株;實驗分為脂質體對照、陰性質粒轉染對照及KLK6 siRNA 重組質粒轉染組,實時熒光定量PCR 法檢測KLK6 mRNA 的錶達的變化,用四甲基偶氮唑鹽(MTT)法測量細胞生長情況.結果 測序證實錶達載體構建成功,在穩定轉染重組質粒PGCsilencerTMH1/GFP/Neo/KLK6的乳腺癌MCF-7細胞株中,KLK6 mRNA抑製率(76%)明顯高于陰性質粒對照組(2.7%),MCF-7細胞增殖活性顯著低于陰性對照組和脂質體對照組.結論 重組質粒PGCsilencerTMH1/GFP/Neo/KLK6可抑製乳腺癌細胞中KLK6基因的錶達,併抑製乳腺癌細胞的生長.
목적 탐토siRNA침묵KLK6기인표체대유선암세포생장적억제작용급기궤제,위유선암적기인진단화치료제공이론의거.방법 침대KLK6 mRNA 서렬설계합성siRNA,구건2개중조질립PGCsilencerTMH1/GFP/Neo/KLK6화PGCsilencerTMH1/GFP/Neo/Non;장중조질립도입유선암MCF-7세포주,G418사선획득은정전염적세포주;실험분위지질체대조、음성질립전염대조급KLK6 siRNA 중조질립전염조,실시형광정량PCR 법검측KLK6 mRNA 적표체적변화,용사갑기우담서염(MTT)법측량세포생장정황.결과 측서증실표체재체구건성공,재은정전염중조질립PGCsilencerTMH1/GFP/Neo/KLK6적유선암MCF-7세포주중,KLK6 mRNA억제솔(76%)명현고우음성질립대조조(2.7%),MCF-7세포증식활성현저저우음성대조조화지질체대조조.결론 중조질립PGCsilencerTMH1/GFP/Neo/KLK6가억제유선암세포중KLK6기인적표체,병억제유선암세포적생장.
