动物医学进展
動物醫學進展
동물의학진전
PROGRESS IN VETERINARY MEDICINE
2012年
3期
52-57
,共6页
刘鼎阔%王立红%徐大为%杨爱华%王建春%秦操%张勇
劉鼎闊%王立紅%徐大為%楊愛華%王建春%秦操%張勇
류정활%왕립홍%서대위%양애화%왕건춘%진조%장용
重组鸡γ干扰素%复性条件%生物学活性
重組鷄γ榦擾素%複性條件%生物學活性
중조계γ간우소%복성조건%생물학활성
为提高鸡IFN-γ基因重组蛋白的复性效率,用18种不同的复性缓冲液对在大肠埃希菌中表达的cIFN-γ进行复性处理,通过SDS-PAGE分析、考马斯亮蓝定量、对鸡胚成纤维细胞以及对鸡胚的保护试验检测复性产物的得率和生物学活性.结果表明,去污剂和疏水剂能保证蛋白的复性得率和复性效率,重组表达产物得率可高达94.7％；氧化还原电势是cIFN-γ成功复性的关键,有生物学活性的复性产物的复性液中均存在氧化还原对GSSG/GSH；经去污剂处理后再复性的产物对细胞保护的有效浓度显著低于直接复性的蛋白.
為提高鷄IFN-γ基因重組蛋白的複性效率,用18種不同的複性緩遲液對在大腸埃希菌中錶達的cIFN-γ進行複性處理,通過SDS-PAGE分析、攷馬斯亮藍定量、對鷄胚成纖維細胞以及對鷄胚的保護試驗檢測複性產物的得率和生物學活性.結果錶明,去汙劑和疏水劑能保證蛋白的複性得率和複性效率,重組錶達產物得率可高達94.7％；氧化還原電勢是cIFN-γ成功複性的關鍵,有生物學活性的複性產物的複性液中均存在氧化還原對GSSG/GSH；經去汙劑處理後再複性的產物對細胞保護的有效濃度顯著低于直接複性的蛋白.
위제고계IFN-γ기인중조단백적복성효솔,용18충불동적복성완충액대재대장애희균중표체적cIFN-γ진행복성처리,통과SDS-PAGE분석、고마사량람정량、대계배성섬유세포이급대계배적보호시험검측복성산물적득솔화생물학활성.결과표명,거오제화소수제능보증단백적복성득솔화복성효솔,중조표체산물득솔가고체94.7％；양화환원전세시cIFN-γ성공복성적관건,유생물학활성적복성산물적복성액중균존재양화환원대GSSG/GSH；경거오제처리후재복성적산물대세포보호적유효농도현저저우직접복성적단백.
