眼科研究
眼科研究
안과연구
CHINESE OPHTHALMIC RESEARCH
2010年
5期
407-411
,共5页
马殿伟%谢学军%李晓微%张梅
馬殿偉%謝學軍%李曉微%張梅
마전위%사학군%리효미%장매
补肾活血中药%转化生长因子-β2%缺氧%视网膜Müller细胞%乳酸脱氢酶%谷氨酰胺合成酶
補腎活血中藥%轉化生長因子-β2%缺氧%視網膜Müller細胞%乳痠脫氫酶%穀氨酰胺閤成酶
보신활혈중약%전화생장인자-β2%결양%시망막Müller세포%유산탈경매%곡안선알합성매
目的 观察在缺氧和(或)转化生长因子-β2 (TGF-β2) 干预条件对体外培养的Müller细胞活力以及谷氨酰胺合成酶(GS)的影响.方法 用出生7d的SD大鼠体外培养视网膜Müller细胞,将第2代细胞在含20%胎牛血清的DMEM中培养24h后,换用无血清的DMEM孵育24h.分组为:空白血清对照组(20%正常SD大鼠血清的DMEM);TGF-β2组(20%正常SD大鼠血清的DMEM及终质量浓度为150ng/L的TGF-β2);模拟缺氧组(20%正常SD大鼠血清的DMEM及终浓度1.0mmol/L的连二亚硫酸钠);TGF-β2+缺氧组(20%正常SD大鼠血清的DMEM液、终浓度1.0mmol/L的连二亚硫酸钠和终质量浓度为150ng/L的TGF-β2);中药血清组(20%中药SD大鼠血清的DMEM);中药血清+TGF-β2+缺氧组(20%中药SD大鼠血清的DMEM、终浓度1.0mmol/L的连二亚硫酸钠和终质量浓度为150ng/L的TGF-β2).以透射电镜观察视网膜Müller细胞超微结构、以490型酶标仪测定细胞外液乳酸脱氢酶(LDH)释放量及GS活性.结果 在缺氧条件下Müller细胞的超微结构发生明显的改变,如:细胞核变形,固缩;细胞器破坏;微绒毛内糖原明显增多.与正常对照组比较,TGF-β2干预组、缺氧组、TGF-β2+缺氧组的LDH释放量均明显增加(P＜0.05),缺氧组、TGF-β2+缺氧组的GS活性均明显下降(P＜0.01);与缺氧组比较,TGF-β2+缺氧组的LDH释放量明显增加、GS活性明显下降(P＜0.05、P＜0.01).补肾活血中药血清能降低24h及48h时正常以及TGF-β2与缺氧同时存在条件下LDH的释放量(P＜0.05),增强12h时正常条件下以及12h和24h时TGF-β2与缺氧同时存在条件下GS的活性(P＜0.05、P＜0.01).结论 TGF-β2可加重缺氧条件下Müller细胞活力与GS活性的降低;补肾活血中药含药血清能增强视网膜Müller细胞活力及GS活性.
目的 觀察在缺氧和(或)轉化生長因子-β2 (TGF-β2) 榦預條件對體外培養的Müller細胞活力以及穀氨酰胺閤成酶(GS)的影響.方法 用齣生7d的SD大鼠體外培養視網膜Müller細胞,將第2代細胞在含20%胎牛血清的DMEM中培養24h後,換用無血清的DMEM孵育24h.分組為:空白血清對照組(20%正常SD大鼠血清的DMEM);TGF-β2組(20%正常SD大鼠血清的DMEM及終質量濃度為150ng/L的TGF-β2);模擬缺氧組(20%正常SD大鼠血清的DMEM及終濃度1.0mmol/L的連二亞硫痠鈉);TGF-β2+缺氧組(20%正常SD大鼠血清的DMEM液、終濃度1.0mmol/L的連二亞硫痠鈉和終質量濃度為150ng/L的TGF-β2);中藥血清組(20%中藥SD大鼠血清的DMEM);中藥血清+TGF-β2+缺氧組(20%中藥SD大鼠血清的DMEM、終濃度1.0mmol/L的連二亞硫痠鈉和終質量濃度為150ng/L的TGF-β2).以透射電鏡觀察視網膜Müller細胞超微結構、以490型酶標儀測定細胞外液乳痠脫氫酶(LDH)釋放量及GS活性.結果 在缺氧條件下Müller細胞的超微結構髮生明顯的改變,如:細胞覈變形,固縮;細胞器破壞;微絨毛內糖原明顯增多.與正常對照組比較,TGF-β2榦預組、缺氧組、TGF-β2+缺氧組的LDH釋放量均明顯增加(P＜0.05),缺氧組、TGF-β2+缺氧組的GS活性均明顯下降(P＜0.01);與缺氧組比較,TGF-β2+缺氧組的LDH釋放量明顯增加、GS活性明顯下降(P＜0.05、P＜0.01).補腎活血中藥血清能降低24h及48h時正常以及TGF-β2與缺氧同時存在條件下LDH的釋放量(P＜0.05),增彊12h時正常條件下以及12h和24h時TGF-β2與缺氧同時存在條件下GS的活性(P＜0.05、P＜0.01).結論 TGF-β2可加重缺氧條件下Müller細胞活力與GS活性的降低;補腎活血中藥含藥血清能增彊視網膜Müller細胞活力及GS活性.
목적 관찰재결양화(혹)전화생장인자-β2 (TGF-β2) 간예조건대체외배양적Müller세포활력이급곡안선알합성매(GS)적영향.방법 용출생7d적SD대서체외배양시망막Müller세포,장제2대세포재함20%태우혈청적DMEM중배양24h후,환용무혈청적DMEM부육24h.분조위:공백혈청대조조(20%정상SD대서혈청적DMEM);TGF-β2조(20%정상SD대서혈청적DMEM급종질량농도위150ng/L적TGF-β2);모의결양조(20%정상SD대서혈청적DMEM급종농도1.0mmol/L적련이아류산납);TGF-β2+결양조(20%정상SD대서혈청적DMEM액、종농도1.0mmol/L적련이아류산납화종질량농도위150ng/L적TGF-β2);중약혈청조(20%중약SD대서혈청적DMEM);중약혈청+TGF-β2+결양조(20%중약SD대서혈청적DMEM、종농도1.0mmol/L적련이아류산납화종질량농도위150ng/L적TGF-β2).이투사전경관찰시망막Müller세포초미결구、이490형매표의측정세포외액유산탈경매(LDH)석방량급GS활성.결과 재결양조건하Müller세포적초미결구발생명현적개변,여:세포핵변형,고축;세포기파배;미융모내당원명현증다.여정상대조조비교,TGF-β2간예조、결양조、TGF-β2+결양조적LDH석방량균명현증가(P＜0.05),결양조、TGF-β2+결양조적GS활성균명현하강(P＜0.01);여결양조비교,TGF-β2+결양조적LDH석방량명현증가、GS활성명현하강(P＜0.05、P＜0.01).보신활혈중약혈청능강저24h급48h시정상이급TGF-β2여결양동시존재조건하LDH적석방량(P＜0.05),증강12h시정상조건하이급12h화24h시TGF-β2여결양동시존재조건하GS적활성(P＜0.05、P＜0.01).결론 TGF-β2가가중결양조건하Müller세포활력여GS활성적강저;보신활혈중약함약혈청능증강시망막Müller세포활력급GS활성.
