肿瘤研究与临床
腫瘤研究與臨床
종류연구여림상
CANCER RESEARCH AND CLINIC
2007年
11期
724-726
,共3页
肝炎病毒,乙型%X蛋白%细胞周期%raf-1蛋白
肝炎病毒,乙型%X蛋白%細胞週期%raf-1蛋白
간염병독,을형%X단백%세포주기%raf-1단백
目的 探讨乙型肝炎病毒x(HBx)蛋白致癌变的分子机制.方法 构建HBx基因真核表达载体pCDNA3.1(+)-x,脂质体转染入HepG2细胞(HepG2X细胞),以pCDNA3.1空载体为对照(HepG2X0细胞),G418选择培养,克隆扩增转染细胞,并用Western blot检测X蛋白的表达;MTS实验检测细胞增生情况;流式细胞仪检测细胞周期变化;检测转染组及对照组raf-1的表达变化.结果 转染组X细胞在相对分子质量为21×103位置有X蛋白的表达,而对照组HepG2X0细胞及未处理的HepG2细胞未见X蛋白的表达.MTS结果显示X细胞增生能力显著高于其他两株细胞(P＜0.01).流式细胞仪结果显示转染后的细胞系凋亡率增高,G1/G0期细胞减少,G2期细胞增多.Western blot结果示转染组X细胞raf-1表达明显较其他两组细胞增高.结论 HBx有推进细胞周期的作用,使细胞快速进入G2期.其机制可能是HBx增加细胞周期蛋白raf-1的表达.
目的 探討乙型肝炎病毒x(HBx)蛋白緻癌變的分子機製.方法 構建HBx基因真覈錶達載體pCDNA3.1(+)-x,脂質體轉染入HepG2細胞(HepG2X細胞),以pCDNA3.1空載體為對照(HepG2X0細胞),G418選擇培養,剋隆擴增轉染細胞,併用Western blot檢測X蛋白的錶達;MTS實驗檢測細胞增生情況;流式細胞儀檢測細胞週期變化;檢測轉染組及對照組raf-1的錶達變化.結果 轉染組X細胞在相對分子質量為21×103位置有X蛋白的錶達,而對照組HepG2X0細胞及未處理的HepG2細胞未見X蛋白的錶達.MTS結果顯示X細胞增生能力顯著高于其他兩株細胞(P＜0.01).流式細胞儀結果顯示轉染後的細胞繫凋亡率增高,G1/G0期細胞減少,G2期細胞增多.Western blot結果示轉染組X細胞raf-1錶達明顯較其他兩組細胞增高.結論 HBx有推進細胞週期的作用,使細胞快速進入G2期.其機製可能是HBx增加細胞週期蛋白raf-1的錶達.
목적 탐토을형간염병독x(HBx)단백치암변적분자궤제.방법 구건HBx기인진핵표체재체pCDNA3.1(+)-x,지질체전염입HepG2세포(HepG2X세포),이pCDNA3.1공재체위대조(HepG2X0세포),G418선택배양,극륭확증전염세포,병용Western blot검측X단백적표체;MTS실험검측세포증생정황;류식세포의검측세포주기변화;검측전염조급대조조raf-1적표체변화.결과 전염조X세포재상대분자질량위21×103위치유X단백적표체,이대조조HepG2X0세포급미처리적HepG2세포미견X단백적표체.MTS결과현시X세포증생능력현저고우기타량주세포(P＜0.01).류식세포의결과현시전염후적세포계조망솔증고,G1/G0기세포감소,G2기세포증다.Western blot결과시전염조X세포raf-1표체명현교기타량조세포증고.결론 HBx유추진세포주기적작용,사세포쾌속진입G2기.기궤제가능시HBx증가세포주기단백raf-1적표체.
