中华微生物学和免疫学杂志
中華微生物學和免疫學雜誌
중화미생물학화면역학잡지
CHINESE JOURNAL OF MICROBIOLOGY AND IMMUNOLOGY
2003年
2期
148-151
,共4页
付劲蓉%李成荣%周玉峰%周雅德
付勁蓉%李成榮%週玉峰%週雅德
부경용%리성영%주옥봉%주아덕
人白细胞介素4%基因修饰%肝母细胞瘤%细胞凋亡%细胞分化
人白細胞介素4%基因脩飾%肝母細胞瘤%細胞凋亡%細胞分化
인백세포개소4%기인수식%간모세포류%세포조망%세포분화
目的研究人白细胞介素4(IL-4)基因修饰对肝母细胞瘤细胞凋亡及分化的影响及可能机制. 方法以逆转录病毒为载体将人IL-4基因导入人肝母细胞瘤细胞系(HepG2)细胞.台盼蓝拒染、瑞氏染色、放射免疫测定、流式细胞仪细胞周期分析、原位杂交等方法检测人IL-4基因修饰后细胞形态、甲胎蛋白合成以及原癌基因c-fos、c-jun、c-myc 表达的变化.流式细胞仪AnnexinⅤ/PI双染色法及间接免疫荧光染色法检测凋亡细胞及凋亡调控基因p53、bcl-2的蛋白表达. 结果 (1) 人IL-4基因修饰较空载体修饰及野生型HepG2细胞的细胞周期发生G0/G1期阻滞,甲胎蛋白分泌量及原癌基因c-fos、c-jun、c-myc表达降低(P＜0.001).细胞在形态及功能上趋向正常肝细胞转化;(2) 较空载体修饰及野生型HepG2细胞,IL-4基因修饰后部分细胞形态上出现核固缩等典型凋亡细胞的特征,流式细胞仪亦检测到18.5%±4.7%的凋亡细胞;(3) 人IL-4基因修饰增加p53而抑制bcl-2表达(P＜0.05). 结论人IL-4 基因修饰可诱导肝母细胞的凋亡及分化,诱导凋亡细胞可能与上调p53蛋白及抑制bcl-2蛋白表达有关.
目的研究人白細胞介素4(IL-4)基因脩飾對肝母細胞瘤細胞凋亡及分化的影響及可能機製. 方法以逆轉錄病毒為載體將人IL-4基因導入人肝母細胞瘤細胞繫(HepG2)細胞.檯盼藍拒染、瑞氏染色、放射免疫測定、流式細胞儀細胞週期分析、原位雜交等方法檢測人IL-4基因脩飾後細胞形態、甲胎蛋白閤成以及原癌基因c-fos、c-jun、c-myc 錶達的變化.流式細胞儀AnnexinⅤ/PI雙染色法及間接免疫熒光染色法檢測凋亡細胞及凋亡調控基因p53、bcl-2的蛋白錶達. 結果 (1) 人IL-4基因脩飾較空載體脩飾及野生型HepG2細胞的細胞週期髮生G0/G1期阻滯,甲胎蛋白分泌量及原癌基因c-fos、c-jun、c-myc錶達降低(P＜0.001).細胞在形態及功能上趨嚮正常肝細胞轉化;(2) 較空載體脩飾及野生型HepG2細胞,IL-4基因脩飾後部分細胞形態上齣現覈固縮等典型凋亡細胞的特徵,流式細胞儀亦檢測到18.5%±4.7%的凋亡細胞;(3) 人IL-4基因脩飾增加p53而抑製bcl-2錶達(P＜0.05). 結論人IL-4 基因脩飾可誘導肝母細胞的凋亡及分化,誘導凋亡細胞可能與上調p53蛋白及抑製bcl-2蛋白錶達有關.
목적연구인백세포개소4(IL-4)기인수식대간모세포류세포조망급분화적영향급가능궤제. 방법이역전록병독위재체장인IL-4기인도입인간모세포류세포계(HepG2)세포.태반람거염、서씨염색、방사면역측정、류식세포의세포주기분석、원위잡교등방법검측인IL-4기인수식후세포형태、갑태단백합성이급원암기인c-fos、c-jun、c-myc 표체적변화.류식세포의AnnexinⅤ/PI쌍염색법급간접면역형광염색법검측조망세포급조망조공기인p53、bcl-2적단백표체. 결과 (1) 인IL-4기인수식교공재체수식급야생형HepG2세포적세포주기발생G0/G1기조체,갑태단백분비량급원암기인c-fos、c-jun、c-myc표체강저(P＜0.001).세포재형태급공능상추향정상간세포전화;(2) 교공재체수식급야생형HepG2세포,IL-4기인수식후부분세포형태상출현핵고축등전형조망세포적특정,류식세포의역검측도18.5%±4.7%적조망세포;(3) 인IL-4기인수식증가p53이억제bcl-2표체(P＜0.05). 결론인IL-4 기인수식가유도간모세포적조망급분화,유도조망세포가능여상조p53단백급억제bcl-2단백표체유관.
