工业微生物
工業微生物
공업미생물
INDUSTRIAL MICROBIOLOGY
2012年
4期
48-53
,共6页
张留权%王玥%丁庆豹%欧伶%许彦梅%张春艳%魏晓琨
張留權%王玥%丁慶豹%歐伶%許彥梅%張春豔%魏曉琨
장류권%왕모%정경표%구령%허언매%장춘염%위효곤
大肠杆菌%L-阿拉伯糖异构酶%β-半乳糖苷酶%D-塔格糖
大腸桿菌%L-阿拉伯糖異構酶%β-半乳糖苷酶%D-塔格糖
대장간균%L-아랍백당이구매%β-반유당감매%D-탑격당
将大肠杆菌K-12中的β-半乳糖苷酶基因lacZ和L-阿拉伯糖异构酶基因araA以串联方式克隆到载体pET-28a(+)上,并转入大肠杆菌BL21( DE3)中进行表达.通过SDS-PAGE分析发现,重组菌株能表达出大量可溶性β-半乳糖苷酶蛋白和L-阿拉伯糖异构酶蛋白.以重悬菌液为酶源,可将乳糖降解为D-半乳糖,并将D-半乳糖转化为D-塔格糖.在温度为50℃,pH 7.0的缓冲液中,经一段时间反应后,D-塔格糖的转化率可达21％以上.加入Mn2+、Co2+和Fe2+均能够使D-塔格糖的转化率提高.
將大腸桿菌K-12中的β-半乳糖苷酶基因lacZ和L-阿拉伯糖異構酶基因araA以串聯方式剋隆到載體pET-28a(+)上,併轉入大腸桿菌BL21( DE3)中進行錶達.通過SDS-PAGE分析髮現,重組菌株能錶達齣大量可溶性β-半乳糖苷酶蛋白和L-阿拉伯糖異構酶蛋白.以重懸菌液為酶源,可將乳糖降解為D-半乳糖,併將D-半乳糖轉化為D-塔格糖.在溫度為50℃,pH 7.0的緩遲液中,經一段時間反應後,D-塔格糖的轉化率可達21％以上.加入Mn2+、Co2+和Fe2+均能夠使D-塔格糖的轉化率提高.
장대장간균K-12중적β-반유당감매기인lacZ화L-아랍백당이구매기인araA이천련방식극륭도재체pET-28a(+)상,병전입대장간균BL21( DE3)중진행표체.통과SDS-PAGE분석발현,중조균주능표체출대량가용성β-반유당감매단백화L-아랍백당이구매단백.이중현균액위매원,가장유당강해위D-반유당,병장D-반유당전화위D-탑격당.재온도위50℃,pH 7.0적완충액중,경일단시간반응후,D-탑격당적전화솔가체21％이상.가입Mn2+、Co2+화Fe2+균능구사D-탑격당적전화솔제고.
