CAJ | 학술논문

目的制备兔抗17种哺乳动物的二级抗体,并进行辣根过氧化物酶标记,为哺乳血清学检测系统的建立提供工具.方法利用饱和硫酸铵沉淀法粗纯抗体后,再利用protein A或protein G亲和层析的方法进一步纯化哺乳动物的IgG,免疫大耳白兔制备抗血清,利用免疫双扩散来检测抗血清的效价,并用Protein A亲和层析的方法来纯化兔抗哺乳动物的二级抗体,采用简易过碘酸钠法对纯化的兔抗哺乳动物的二级抗体进行辣根过氧化物酶标记,通过ELlSA方法测定标记抗体的效价,并利用Western blot方法考察标记抗体的特异性.结果纯化了恒河猴、东北虎、布氏田鼠、黑线姬鼠、斑羚、原驼、果子狸、食蟹猴、梅花鹿、长爪沙鼠、马鹿、骆驼、大仓鼠、豚鹿、熊猴、大耳羊和雪貂等17种哺乳动物的血清IgG,分别免疫大耳白兔制备了这17种哺乳动物的兔抗血清,免疫双扩散法测定兔抗这17种哺乳动物的抗血清效价均达到1:32,并对纯化的兔抗恒河猴IgG、兔抗东北虎IgG、兔抗布氏田鼠IgG、兔抗黑线姬鼠IgG、兔抗斑羚IgG、兔抗原驼IgG、兔抗果子狸IgG、兔抗食蟹猴IgG、兔抗梅花鹿IgG、兔抗长爪沙鼠IgG、兔抗马鹿IgG、兔抗骆驼IgG、兔抗大仓鼠IgG、兔抗豚鹿IgG、兔抗熊猴IgG、兔抗大耳羊IgG和兔抗雪貂IgG等17种哺乳动物的二级抗体进行了辣根过氧化物酶标记,ELISA测定标记抗体的效价达到1:(2000～60000)左右,Western blots显示标记抗体具有很好的特异性.结论成功制备了HRP标记的兔抗17种哺乳动物的二级抗体,为哺乳动物血清学检测体系的建立提供了工具.
목적 제비토항17충포유동물적이급항체,병진행랄근과양화물매표기,위포유혈청학검측계통적건립제공공구.방법 이용포화류산안침정법조순항체후,재이용protein A혹protein G친화층석적방법진일보순화포유동물적IgG,면역대이백토제비항혈청,이용면역쌍확산래검측항혈청적효개,병용Protein A친화층석적방법래순화토항포유동물적이급항체,채용간역과전산납법대순화적토항포유동물적이급항체진행랄근과양화물매표기,통과ELlSA방법측정표기항체적효개,병이용Western blot방법고찰표기항체적특이성.결과 순화료항하후、동북호、포씨전서、흑선희서、반령、원타、과자리、식해후、매화록、장조사서、마록、락타、대창서、돈록、웅후、대이양화설초등17충포유동물적혈청IgG,분별면역대이백토제비료저17충포유동물적토항혈청,면역쌍확산법측정토항저17충포유동물적항혈청효개균체도1:32,병대순화적토항항하후IgG、토항동북호IgG、토항포씨전서IgG、토항흑선희서IgG、토항반령IgG、토항원타IgG、토항과자리IgG、토항식해후IgG、토항매화록IgG、토항장조사서IgG、토항마록IgG、토항락타IgG、토항대창서IgG、토항돈록IgG、토항웅후IgG、토항대이양IgG화토항설초IgG등17충포유동물적이급항체진행료랄근과양화물매표기,ELISA측정표기항체적효개체도1:(2000～60000)좌우,Western blots현시표기항체구유흔호적특이성.결론 성공제비료HRP표기적토항17충포유동물적이급항체,위포유동물혈청학검측체계적건립제공료공구.