植物保护
植物保護
식물보호
PLANT PROTECTION
2010年
3期
125-129
,共5页
朱海荣%段霞瑜%周益林%邱永春
硃海榮%段霞瑜%週益林%邱永春
주해영%단하유%주익림%구영춘
小麦白粉病菌%DNA微量提取%ISSR-PCR%体系优化
小麥白粉病菌%DNA微量提取%ISSR-PCR%體繫優化
소맥백분병균%DNA미량제취%ISSR-PCR%체계우화
为了寻找适合小麦白粉菌基因组DNA微量提取的方法,本试验利用改进的CTAB法、电钻微量研磨一管法、FastPrep DNA试剂盒法和Chelex-100法分别提取小麦白粉菌基因组DNA.比较得出,在微量提取时,CTAB法的提取率较高;在分生孢子量较多时,FastPrep DNA试剂盒方法提取的DNA质量较高,这两种方法提取的DNA均适用于ISSR-PCR.采用正交设计L16(45)法优化了适合于小麦白粉病菌群体的ISSR体系,确定了25 μL时优化的反应体系:1×buffer、模板DNA 0.5 ng、dNTP 0.14 mmol/L、TaqDNA聚合酶1U、引物1.4 μmol/L、Me2+1.8 mmoL/L.利用该体系筛选出了一批多态性较好的ISSR引物,为小麦白粉病菌遗传多样性研究奠定了基础.
為瞭尋找適閤小麥白粉菌基因組DNA微量提取的方法,本試驗利用改進的CTAB法、電鑽微量研磨一管法、FastPrep DNA試劑盒法和Chelex-100法分彆提取小麥白粉菌基因組DNA.比較得齣,在微量提取時,CTAB法的提取率較高;在分生孢子量較多時,FastPrep DNA試劑盒方法提取的DNA質量較高,這兩種方法提取的DNA均適用于ISSR-PCR.採用正交設計L16(45)法優化瞭適閤于小麥白粉病菌群體的ISSR體繫,確定瞭25 μL時優化的反應體繫:1×buffer、模闆DNA 0.5 ng、dNTP 0.14 mmol/L、TaqDNA聚閤酶1U、引物1.4 μmol/L、Me2+1.8 mmoL/L.利用該體繫篩選齣瞭一批多態性較好的ISSR引物,為小麥白粉病菌遺傳多樣性研究奠定瞭基礎.
위료심조괄합소맥백분균기인조DNA미량제취적방법,본시험이용개진적CTAB법、전찬미량연마일관법、FastPrep DNA시제합법화Chelex-100법분별제취소맥백분균기인조DNA.비교득출,재미량제취시,CTAB법적제취솔교고;재분생포자량교다시,FastPrep DNA시제합방법제취적DNA질량교고,저량충방법제취적DNA균괄용우ISSR-PCR.채용정교설계L16(45)법우화료괄합우소맥백분병균군체적ISSR체계,학정료25 μL시우화적반응체계:1×buffer、모판DNA 0.5 ng、dNTP 0.14 mmol/L、TaqDNA취합매1U、인물1.4 μmol/L、Me2+1.8 mmoL/L.이용해체계사선출료일비다태성교호적ISSR인물,위소맥백분병균유전다양성연구전정료기출.
