中国实验血液学杂志
中國實驗血液學雜誌
중국실험혈액학잡지
JOURNAL OF EXPERIMENTAL HEMATOLOGY
2010年
1期
224-229
,共6页
黄友章%沈建良%宫立众%郑培浩%刘毅%尹文杰%岑坚%王宁%赵德峰
黃友章%瀋建良%宮立衆%鄭培浩%劉毅%尹文傑%岑堅%王寧%趙德峰
황우장%침건량%궁립음%정배호%류의%윤문걸%잠견%왕저%조덕봉
骨髓细胞%低温保护剂%程控降温%-80℃低温冰箱降温
骨髓細胞%低溫保護劑%程控降溫%-80℃低溫冰箱降溫
골수세포%저온보호제%정공강온%-80℃저온빙상강온
为探讨适合临床应用的骨髓细胞保存方法,揭示细胞长期低温保存效果,将20人份骨髓加入DMSO-AuP(10%二甲亚砜、10%自体血浆)或DMSO-HES-HuA(5%DMSO、6%羟乙基淀粉、4%人血白蛋白)保护剂,分装2毫升/管,600-800管/人份,自控程序降温仪或-80℃低温冰箱预冻降温、液氮中保存21-25年.取冷冻骨髓细胞于38℃复温,检测细胞相关指标.结果表明:加保护剂的细胞标本在-80℃低温冰箱中为低速降温,-30℃前,与自控程序降温仪设定1℃/min的低降温速率接近.DMSO-HES-HuA与DMSO-AuP比较,红细胞形态畸形率分别为(3.5±1.5)%和(12.6±4.8)%;溶血率分别为(3.3±1.6)%和(23.1±5.1)%(p＜0.05);前者渗透性脆性不变,后者减低;红细胞、血小板、粒单系造血祖细胞、长期培养起始细胞回收率,前后者对比分别为(96.1±1.8)%、(70.0±9.5)%、(49.2±10.9)%、(54.2±13.8)% vs(76.3±5.6)%、(52.7±8.1)%、(43.5±12.3)%、(47.2±13.6)%.用上述保护剂配合上述降温法保存后,细胞在间充质干细胞培养上,生长特性良好.同一保护剂用上述两种降温法保存后,细胞各种回收效果差异不显著(p＞0.05).结论:细胞在液氮中保存21-25年,其细胞形态和回收活力(率)良好;保存如骨髓这种细胞成分并非单一的标本时,用5% DMSO-6%HES-4%HuA为保护剂的-80℃冰箱预冻降温后液氮保存,方法简便、经济、易操作,适合临床应用.
為探討適閤臨床應用的骨髓細胞保存方法,揭示細胞長期低溫保存效果,將20人份骨髓加入DMSO-AuP(10%二甲亞砜、10%自體血漿)或DMSO-HES-HuA(5%DMSO、6%羥乙基澱粉、4%人血白蛋白)保護劑,分裝2毫升/管,600-800管/人份,自控程序降溫儀或-80℃低溫冰箱預凍降溫、液氮中保存21-25年.取冷凍骨髓細胞于38℃複溫,檢測細胞相關指標.結果錶明:加保護劑的細胞標本在-80℃低溫冰箱中為低速降溫,-30℃前,與自控程序降溫儀設定1℃/min的低降溫速率接近.DMSO-HES-HuA與DMSO-AuP比較,紅細胞形態畸形率分彆為(3.5±1.5)%和(12.6±4.8)%;溶血率分彆為(3.3±1.6)%和(23.1±5.1)%(p＜0.05);前者滲透性脆性不變,後者減低;紅細胞、血小闆、粒單繫造血祖細胞、長期培養起始細胞迴收率,前後者對比分彆為(96.1±1.8)%、(70.0±9.5)%、(49.2±10.9)%、(54.2±13.8)% vs(76.3±5.6)%、(52.7±8.1)%、(43.5±12.3)%、(47.2±13.6)%.用上述保護劑配閤上述降溫法保存後,細胞在間充質榦細胞培養上,生長特性良好.同一保護劑用上述兩種降溫法保存後,細胞各種迴收效果差異不顯著(p＞0.05).結論:細胞在液氮中保存21-25年,其細胞形態和迴收活力(率)良好;保存如骨髓這種細胞成分併非單一的標本時,用5% DMSO-6%HES-4%HuA為保護劑的-80℃冰箱預凍降溫後液氮保存,方法簡便、經濟、易操作,適閤臨床應用.
위탐토괄합림상응용적골수세포보존방법,게시세포장기저온보존효과,장20인빈골수가입DMSO-AuP(10%이갑아풍、10%자체혈장)혹DMSO-HES-HuA(5%DMSO、6%간을기정분、4%인혈백단백)보호제,분장2호승/관,600-800관/인빈,자공정서강온의혹-80℃저온빙상예동강온、액담중보존21-25년.취냉동골수세포우38℃복온,검측세포상관지표.결과표명:가보호제적세포표본재-80℃저온빙상중위저속강온,-30℃전,여자공정서강온의설정1℃/min적저강온속솔접근.DMSO-HES-HuA여DMSO-AuP비교,홍세포형태기형솔분별위(3.5±1.5)%화(12.6±4.8)%;용혈솔분별위(3.3±1.6)%화(23.1±5.1)%(p＜0.05);전자삼투성취성불변,후자감저;홍세포、혈소판、립단계조혈조세포、장기배양기시세포회수솔,전후자대비분별위(96.1±1.8)%、(70.0±9.5)%、(49.2±10.9)%、(54.2±13.8)% vs(76.3±5.6)%、(52.7±8.1)%、(43.5±12.3)%、(47.2±13.6)%.용상술보호제배합상술강온법보존후,세포재간충질간세포배양상,생장특성량호.동일보호제용상술량충강온법보존후,세포각충회수효과차이불현저(p＞0.05).결론:세포재액담중보존21-25년,기세포형태화회수활력(솔)량호;보존여골수저충세포성분병비단일적표본시,용5% DMSO-6%HES-4%HuA위보호제적-80℃빙상예동강온후액담보존,방법간편、경제、역조작,괄합림상응용.
