分子植物育种
分子植物育種
분자식물육충
MOLECULAR PLANT BREEDING
2009年
3期
444-450
,共7页
唐晓飞%刘丽君%高明杰%杨喆%蒲国峰%张雷%魏崃
唐曉飛%劉麗君%高明傑%楊喆%蒲國峰%張雷%魏崍
당효비%류려군%고명걸%양철%포국봉%장뢰%위래
大豆%农杆菌转化%热激转录因子8基因%耐热性
大豆%農桿菌轉化%熱激轉錄因子8基因%耐熱性
대두%농간균전화%열격전록인자8기인%내열성
环境胁迫严重影响作物的生长和发育,热激转录因子(heat shock factor 8,HSF)是一类在热应激反应中起重要作用的蛋白质,主要功能是在热休克基因的表达过程中与相应热激元件结合,启动基因的转录过程,最终促进热休克蛋白(HSP)基因的表达.本文将热激转录因子8(hsf8)基因构建在植物表达载体pCAMBIA3300中,以大豆子叶节作为受体,通过农杆菌介导法将hsf8基因导入品质性状优良的两个高产大豆新品系哈交5337和哈交5489中,最后获得转基因植株.在开展大豆遗传转化过程中,探讨了农杆菌介导大豆子叶节转化体系的影响因素,优化了转化条件.在共培养后,采用延迟筛选的方法来提高选择效率.并确定草胺磷筛选浓度为3.5 mg/L.获得转化质粒pCAMBIA3300-HSF8的转基因植株,其中T1代PCR阳性植株17株.采用Real-time PCR的方法对T1代抗性植株进行hsf8基因的转录水平的相对定量分析,确定9株较非转基因植株哈交5337表达量明显提高.有1株明显低于哈交5489的hsf8基因表达量.
環境脅迫嚴重影響作物的生長和髮育,熱激轉錄因子(heat shock factor 8,HSF)是一類在熱應激反應中起重要作用的蛋白質,主要功能是在熱休剋基因的錶達過程中與相應熱激元件結閤,啟動基因的轉錄過程,最終促進熱休剋蛋白(HSP)基因的錶達.本文將熱激轉錄因子8(hsf8)基因構建在植物錶達載體pCAMBIA3300中,以大豆子葉節作為受體,通過農桿菌介導法將hsf8基因導入品質性狀優良的兩箇高產大豆新品繫哈交5337和哈交5489中,最後穫得轉基因植株.在開展大豆遺傳轉化過程中,探討瞭農桿菌介導大豆子葉節轉化體繫的影響因素,優化瞭轉化條件.在共培養後,採用延遲篩選的方法來提高選擇效率.併確定草胺燐篩選濃度為3.5 mg/L.穫得轉化質粒pCAMBIA3300-HSF8的轉基因植株,其中T1代PCR暘性植株17株.採用Real-time PCR的方法對T1代抗性植株進行hsf8基因的轉錄水平的相對定量分析,確定9株較非轉基因植株哈交5337錶達量明顯提高.有1株明顯低于哈交5489的hsf8基因錶達量.
배경협박엄중영향작물적생장화발육,열격전록인자(heat shock factor 8,HSF)시일류재열응격반응중기중요작용적단백질,주요공능시재열휴극기인적표체과정중여상응열격원건결합,계동기인적전록과정,최종촉진열휴극단백(HSP)기인적표체.본문장열격전록인자8(hsf8)기인구건재식물표체재체pCAMBIA3300중,이대두자협절작위수체,통과농간균개도법장hsf8기인도입품질성상우량적량개고산대두신품계합교5337화합교5489중,최후획득전기인식주.재개전대두유전전화과정중,탐토료농간균개도대두자협절전화체계적영향인소,우화료전화조건.재공배양후,채용연지사선적방법래제고선택효솔.병학정초알린사선농도위3.5 mg/L.획득전화질립pCAMBIA3300-HSF8적전기인식주,기중T1대PCR양성식주17주.채용Real-time PCR적방법대T1대항성식주진행hsf8기인적전록수평적상대정량분석,학정9주교비전기인식주합교5337표체량명현제고.유1주명현저우합교5489적hsf8기인표체량.
