肿瘤
腫瘤
종류
TUMOR
2009年
4期
345-349
,共5页
王琳琳%郑洪%唐薇薇%厉国慧%安文波
王琳琳%鄭洪%唐薇薇%厲國慧%安文波
왕림림%정홍%당미미%려국혜%안문파
黑色素瘤,实验性%RNA干扰%细胞凋亡%细胞周期%基因,livin
黑色素瘤,實驗性%RNA榦擾%細胞凋亡%細胞週期%基因,livin
흑색소류,실험성%RNA간우%세포조망%세포주기%기인,livin
目的:探讨小干扰RNA(small interfening RNA, siRNA)沉默livin基因对人恶性黑素瘤A375细胞周期和凋亡的影响.方法:构建2个针对人源livin基因的siRNA表达质粒,并通过脂质体介导转染人恶性黑素瘤A375细胞株,利用荧光定量PCR检测livin mRNA的表达情况,Annexin Ⅴ-PE FCM法检测A375细胞凋亡情况,PI单染FCM法检测细胞周期情况.结果:成功构建livin siRNA表达质粒,转染siRNA-1和siRNA-2后48 h 的A375细胞中 livin mRNA表达量较空白对照组分别下降17%和42%,72 h分别下降71%和61%.转染siRNA-1和siRNA-2后48 h 的A375细胞凋亡率(29.45%和33.25%)及72 h细胞凋亡率(33.52%和38.18%)均高于空白组(7.95%和9.70%)(P<0.05).siRNA-2可引起G0/G1期升高,S期下降(P<0.05),siRNA-1作用不明显(P>0.05).结论:siRNA-1、2体外均能有效抑制livin mRNA的转录,促进人恶性黑素瘤A375细胞凋亡.siRNA-2表达质粒能使人恶性黑素瘤A375细胞周期出现G0/G1期阻滞,细胞增殖受到抑制.
目的:探討小榦擾RNA(small interfening RNA, siRNA)沉默livin基因對人噁性黑素瘤A375細胞週期和凋亡的影響.方法:構建2箇針對人源livin基因的siRNA錶達質粒,併通過脂質體介導轉染人噁性黑素瘤A375細胞株,利用熒光定量PCR檢測livin mRNA的錶達情況,Annexin Ⅴ-PE FCM法檢測A375細胞凋亡情況,PI單染FCM法檢測細胞週期情況.結果:成功構建livin siRNA錶達質粒,轉染siRNA-1和siRNA-2後48 h 的A375細胞中 livin mRNA錶達量較空白對照組分彆下降17%和42%,72 h分彆下降71%和61%.轉染siRNA-1和siRNA-2後48 h 的A375細胞凋亡率(29.45%和33.25%)及72 h細胞凋亡率(33.52%和38.18%)均高于空白組(7.95%和9.70%)(P<0.05).siRNA-2可引起G0/G1期升高,S期下降(P<0.05),siRNA-1作用不明顯(P>0.05).結論:siRNA-1、2體外均能有效抑製livin mRNA的轉錄,促進人噁性黑素瘤A375細胞凋亡.siRNA-2錶達質粒能使人噁性黑素瘤A375細胞週期齣現G0/G1期阻滯,細胞增殖受到抑製.
목적:탐토소간우RNA(small interfening RNA, siRNA)침묵livin기인대인악성흑소류A375세포주기화조망적영향.방법:구건2개침대인원livin기인적siRNA표체질립,병통과지질체개도전염인악성흑소류A375세포주,이용형광정량PCR검측livin mRNA적표체정황,Annexin Ⅴ-PE FCM법검측A375세포조망정황,PI단염FCM법검측세포주기정황.결과:성공구건livin siRNA표체질립,전염siRNA-1화siRNA-2후48 h 적A375세포중 livin mRNA표체량교공백대조조분별하강17%화42%,72 h분별하강71%화61%.전염siRNA-1화siRNA-2후48 h 적A375세포조망솔(29.45%화33.25%)급72 h세포조망솔(33.52%화38.18%)균고우공백조(7.95%화9.70%)(P<0.05).siRNA-2가인기G0/G1기승고,S기하강(P<0.05),siRNA-1작용불명현(P>0.05).결론:siRNA-1、2체외균능유효억제livin mRNA적전록,촉진인악성흑소류A375세포조망.siRNA-2표체질립능사인악성흑소류A375세포주기출현G0/G1기조체,세포증식수도억제.
