药学学报
藥學學報
약학학보
ACTA PHARMACEUTICA SINICA
2008年
12期
1251-1257
,共7页
王学勇%崔光红%黄璐琦%高伟%袁媛
王學勇%崔光紅%黃璐琦%高偉%袁媛
왕학용%최광홍%황로기%고위%원원
丹参%SmCMK%RACE%克隆%茉莉酸甲酯
丹參%SmCMK%RACE%剋隆%茉莉痠甲酯
단삼%SmCMK%RACE%극륭%말리산갑지
本文首次从丹参毛状根中克隆得到了丹参4-(5′-二磷酸胞苷)-2-C-甲基-D-赤藓醇激酶(简称为SmCMK)的编码基因的全长cDNA序列,GenBank注册号:EF534309.KEGG软件分析表明:SmCMK位于二萜类化合物生物合成的上游途径--非甲羟戊酸途径(DXP),是DXP途径上唯一的激酶.所克隆的SmCMK基因序列全长1 493 bp,包括完整的开放阅读框(open readingframe,ORF),推测编码396个氨基酸的多肽,分子质量为43.302 kDa,等电点(pI)值为6.78;含有71 bp的5′非转译区(5′ UTR)和232 bp的3′非转译区(3′ UTR).末尾具有完整的AATAA加尾信号和PolyA结构,说明所克隆基因的序列较为完整.经序列比对分析表明,SmCMK与其他植物CMK激酶家族具有较高的同源性.实时荧光定量PCR结果显示该基因受茉莉酸甲酯(MJ)诱导后表达水平显著升高,与丹参酮类成分含量受MJ诱导后的增加趋势一致,初步证明了SmCMK基因表达量与丹参酮类成分的积累之间的关系,为进一步研究丹参酮类成分的次生代谢调控机制奠定了基础.
本文首次從丹參毛狀根中剋隆得到瞭丹參4-(5′-二燐痠胞苷)-2-C-甲基-D-赤蘚醇激酶(簡稱為SmCMK)的編碼基因的全長cDNA序列,GenBank註冊號:EF534309.KEGG軟件分析錶明:SmCMK位于二萜類化閤物生物閤成的上遊途徑--非甲羥戊痠途徑(DXP),是DXP途徑上唯一的激酶.所剋隆的SmCMK基因序列全長1 493 bp,包括完整的開放閱讀框(open readingframe,ORF),推測編碼396箇氨基痠的多肽,分子質量為43.302 kDa,等電點(pI)值為6.78;含有71 bp的5′非轉譯區(5′ UTR)和232 bp的3′非轉譯區(3′ UTR).末尾具有完整的AATAA加尾信號和PolyA結構,說明所剋隆基因的序列較為完整.經序列比對分析錶明,SmCMK與其他植物CMK激酶傢族具有較高的同源性.實時熒光定量PCR結果顯示該基因受茉莉痠甲酯(MJ)誘導後錶達水平顯著升高,與丹參酮類成分含量受MJ誘導後的增加趨勢一緻,初步證明瞭SmCMK基因錶達量與丹參酮類成分的積纍之間的關繫,為進一步研究丹參酮類成分的次生代謝調控機製奠定瞭基礎.
본문수차종단삼모상근중극륭득도료단삼4-(5′-이린산포감)-2-C-갑기-D-적선순격매(간칭위SmCMK)적편마기인적전장cDNA서렬,GenBank주책호:EF534309.KEGG연건분석표명:SmCMK위우이첩류화합물생물합성적상유도경--비갑간무산도경(DXP),시DXP도경상유일적격매.소극륭적SmCMK기인서렬전장1 493 bp,포괄완정적개방열독광(open readingframe,ORF),추측편마396개안기산적다태,분자질량위43.302 kDa,등전점(pI)치위6.78;함유71 bp적5′비전역구(5′ UTR)화232 bp적3′비전역구(3′ UTR).말미구유완정적AATAA가미신호화PolyA결구,설명소극륭기인적서렬교위완정.경서렬비대분석표명,SmCMK여기타식물CMK격매가족구유교고적동원성.실시형광정량PCR결과현시해기인수말리산갑지(MJ)유도후표체수평현저승고,여단삼동류성분함량수MJ유도후적증가추세일치,초보증명료SmCMK기인표체량여단삼동류성분적적루지간적관계,위진일보연구단삼동류성분적차생대사조공궤제전정료기출.
