复旦学报（医学版）
複旦學報（醫學版）
복단학보（의학판）
FUDAN UNIVERSITY JOURNAL OF MEDICAL SCIENCES
2008年
6期
857-861
,共5页
徐彬%靳大勇%王单松%刘新垣%秦新裕
徐彬%靳大勇%王單鬆%劉新垣%秦新裕
서빈%근대용%왕단송%류신원%진신유
胰腺癌%溶瘤腺病毒%lipoealin2
胰腺癌%溶瘤腺病毒%lipoealin2
이선암%용류선병독%lipoealin2
目的 构建携带人lipocalin 2基因且删除E1855基因的溶瘤腺病毒,研究其体外对胰腺癌细胞生长的抑制作用.方法 利用RT-PCR技术获得lipocalin 2基因并克隆至pCA13质粒,构建pCA13-lipocalin 2.用Bgl Ⅱ从pCA13-lipocalin 2酶切出包含CMV启动子及lipocalin 2的表达框,将该表达框亚克隆入质粒pZD55,获得pZD55-lipocalin 2.将pZD55-lipocalin 2与pBHGE3共转染293个细胞,重组产生携带lipocalin 2的溶瘤腺病毒ZD55-lipocalin 2.经PCR和Western blot鉴定正确后,体外采用结晶紫染色和MTT法,观察其对胰腺癌细胞生长的抑制作用.结果 ZD55-lipocalin 2能在PANC-1细胞中增殖复制并表达lipoealin 2蛋白,结晶紫染色和MTT法观察到该溶瘤腺病毒能明显抑制PANC-1细胞生长.结论 成功构建了携带入lipocalin 2的溶瘤腺病毒,其能明显抑制胰腺癌细胞生长,为胰腺癌治疗提供新策略.
目的 構建攜帶人lipocalin 2基因且刪除E1855基因的溶瘤腺病毒,研究其體外對胰腺癌細胞生長的抑製作用.方法 利用RT-PCR技術穫得lipocalin 2基因併剋隆至pCA13質粒,構建pCA13-lipocalin 2.用Bgl Ⅱ從pCA13-lipocalin 2酶切齣包含CMV啟動子及lipocalin 2的錶達框,將該錶達框亞剋隆入質粒pZD55,穫得pZD55-lipocalin 2.將pZD55-lipocalin 2與pBHGE3共轉染293箇細胞,重組產生攜帶lipocalin 2的溶瘤腺病毒ZD55-lipocalin 2.經PCR和Western blot鑒定正確後,體外採用結晶紫染色和MTT法,觀察其對胰腺癌細胞生長的抑製作用.結果 ZD55-lipocalin 2能在PANC-1細胞中增殖複製併錶達lipoealin 2蛋白,結晶紫染色和MTT法觀察到該溶瘤腺病毒能明顯抑製PANC-1細胞生長.結論 成功構建瞭攜帶入lipocalin 2的溶瘤腺病毒,其能明顯抑製胰腺癌細胞生長,為胰腺癌治療提供新策略.
목적 구건휴대인lipocalin 2기인차산제E1855기인적용류선병독,연구기체외대이선암세포생장적억제작용.방법 이용RT-PCR기술획득lipocalin 2기인병극륭지pCA13질립,구건pCA13-lipocalin 2.용Bgl Ⅱ종pCA13-lipocalin 2매절출포함CMV계동자급lipocalin 2적표체광,장해표체광아극륭입질립pZD55,획득pZD55-lipocalin 2.장pZD55-lipocalin 2여pBHGE3공전염293개세포,중조산생휴대lipocalin 2적용류선병독ZD55-lipocalin 2.경PCR화Western blot감정정학후,체외채용결정자염색화MTT법,관찰기대이선암세포생장적억제작용.결과 ZD55-lipocalin 2능재PANC-1세포중증식복제병표체lipoealin 2단백,결정자염색화MTT법관찰도해용류선병독능명현억제PANC-1세포생장.결론 성공구건료휴대입lipocalin 2적용류선병독,기능명현억제이선암세포생장,위이선암치료제공신책략.
