江苏农业学报
江囌農業學報
강소농업학보
JIANGSU JOURNAL OF AGRICULTURAL SCIENCES
2008年
3期
288-292
,共5页
迟灵芝%刘茂军%冯志新%单虎%邵国青
遲靈芝%劉茂軍%馮誌新%單虎%邵國青
지령지%류무군%풍지신%단호%소국청
猪肺炎支原体%重叠延伸PCR%定点突变%表达
豬肺炎支原體%重疊延伸PCR%定點突變%錶達
저폐염지원체%중첩연신PCR%정점돌변%표체
参考GenBank登录的猪肺炎支原体(Mhp)P46基因序列,利用Primer 5.0软件设计合成引物,通过重叠延伸PCR(SOE-PCR)对猪肺炎支原体P46基因的3个位点进行定点突变,将此突变基因插入到表达载体pET-32a(+)中,经IPTG诱导后成功地在大肠杆菌Rosetta(DE3)宿主菌中表达分子量约为63 500的融合蛋白.Western blotting分析表明,该融合蛋白具有较好的免疫原性.为猪肺炎支原体抗体ELISA检测方法的建立奠定了基础.
參攷GenBank登錄的豬肺炎支原體(Mhp)P46基因序列,利用Primer 5.0軟件設計閤成引物,通過重疊延伸PCR(SOE-PCR)對豬肺炎支原體P46基因的3箇位點進行定點突變,將此突變基因插入到錶達載體pET-32a(+)中,經IPTG誘導後成功地在大腸桿菌Rosetta(DE3)宿主菌中錶達分子量約為63 500的融閤蛋白.Western blotting分析錶明,該融閤蛋白具有較好的免疫原性.為豬肺炎支原體抗體ELISA檢測方法的建立奠定瞭基礎.
삼고GenBank등록적저폐염지원체(Mhp)P46기인서렬,이용Primer 5.0연건설계합성인물,통과중첩연신PCR(SOE-PCR)대저폐염지원체P46기인적3개위점진행정점돌변,장차돌변기인삽입도표체재체pET-32a(+)중,경IPTG유도후성공지재대장간균Rosetta(DE3)숙주균중표체분자량약위63 500적융합단백.Western blotting분석표명,해융합단백구유교호적면역원성.위저폐염지원체항체ELISA검측방법적건립전정료기출.
