中国热带医学
中國熱帶醫學
중국열대의학
CHINA TROPICAL MEDICINE
2008年
10期
1675-1677
,共3页
何雅青%何丽芸%姚相杰%杨洪%房师松%舒柏华
何雅青%何麗蕓%姚相傑%楊洪%房師鬆%舒柏華
하아청%하려예%요상걸%양홍%방사송%서백화
手足口病%肠道病毒%荧光定量RT-PCR
手足口病%腸道病毒%熒光定量RT-PCR
수족구병%장도병독%형광정량RT-PCR
目的 建立荧光定量RT-PCR技术用于检测手足口病的肠道病毒. 方法利用TaqMan技术,设计一对共引物及探针,建立、优化反应体系后,构建质粒标准品,利用10倍稀释法建立相对定量标准曲线,根据TCID50倍比稀释,建立灵敏度曲线.特异性检验后利用临床标本与传统的RT-PCR法进行比较. 结果定量标准曲线的灵敏度为10/μl(R2=0.999),PCR扩增效率为94%.灵敏度曲线显示检测到的最低浓度值为5.0TCID50/ml(R2=0.99),PCR扩增效率为97.6%.荧光RT-PCR检出率为80.9%,显著高于RT-PCa(检出率为62.92%). 结论研究建立的荧光定量RT-PCR方法检测肠道病毒敏感性高、特异性好、效率高,可以作为肠道病毒的快速检测方法.
目的 建立熒光定量RT-PCR技術用于檢測手足口病的腸道病毒. 方法利用TaqMan技術,設計一對共引物及探針,建立、優化反應體繫後,構建質粒標準品,利用10倍稀釋法建立相對定量標準麯線,根據TCID50倍比稀釋,建立靈敏度麯線.特異性檢驗後利用臨床標本與傳統的RT-PCR法進行比較. 結果定量標準麯線的靈敏度為10/μl(R2=0.999),PCR擴增效率為94%.靈敏度麯線顯示檢測到的最低濃度值為5.0TCID50/ml(R2=0.99),PCR擴增效率為97.6%.熒光RT-PCR檢齣率為80.9%,顯著高于RT-PCa(檢齣率為62.92%). 結論研究建立的熒光定量RT-PCR方法檢測腸道病毒敏感性高、特異性好、效率高,可以作為腸道病毒的快速檢測方法.
목적 건립형광정량RT-PCR기술용우검측수족구병적장도병독. 방법이용TaqMan기술,설계일대공인물급탐침,건립、우화반응체계후,구건질립표준품,이용10배희석법건립상대정량표준곡선,근거TCID50배비희석,건립령민도곡선.특이성검험후이용림상표본여전통적RT-PCR법진행비교. 결과정량표준곡선적령민도위10/μl(R2=0.999),PCR확증효솔위94%.령민도곡선현시검측도적최저농도치위5.0TCID50/ml(R2=0.99),PCR확증효솔위97.6%.형광RT-PCR검출솔위80.9%,현저고우RT-PCa(검출솔위62.92%). 결론연구건립적형광정량RT-PCR방법검측장도병독민감성고、특이성호、효솔고,가이작위장도병독적쾌속검측방법.
