CAJ | 학술논문

背景:通常采用阿辛蓝染色技术鉴定软骨组织,然而对于组织工程软骨形成早期,阿辛蓝染色不能很好的显示细胞外基质的分泌情况.目的:拟观察采用免疫组织化学法S-100抗原结合α-肌动蛋白抗原染色鉴别人工合成组织工程化软骨结构的可行性.设计、时间及地点:对比观察,于2006-12/2008-02在深圳市人民医院临床医学研究中心完成.材料:2周龄SPF级SD大鼠,体质量50～60 g,用于体外培养剑突软骨细胞;DegraPol材料,长20 mm,内,外径分别为2.5/4 mm,管壁厚度为0.75 mm,由瑞士联邦理工大学聚合材料研究所提供.方法:于第3代收集软骨细胞接种于DegraPol管状支架形成软骨细胞-支架复合物,体外培养3周后植入同系大鼠腹腔大网膜体内培养1周.分别于体外培养3周和体内培养1周后取软骨细胞-DegraPol复合物制备组织学检测标本行苏木精-伊红染色和S-100抗原、α-肌动蛋白抗体免疫组织化学染色.主要观察指标:倒置显微镜观察软骨细胞-DegraPol复合物的变化;免疫组织化学染色鉴定软骨细胞.结果:体外培养3周后,苏木精-伊红染色显示软骨细胞位于软骨陷窝内,软骨基质呈蓝色.种植软骨细胞于DegraPol管状泡沫材料支架内侧面,体外培养3周后,在管腔的内侧壁S-100抗原阳性表达,α-肌动蛋白抗原阴性.证实在细胞-支架复合物植入同系大鼠体内培养之前已经形成了新的组织工程化软骨层.置入动物体内培养1周后,所获得的新组织为混合性的细胞结构,S-100抗原阳性多集中在管腔的内侧壁,而α-肌动蛋白抗原阳性反应多集中在管腔的外侧壁.结论:软骨组织S-100抗原阳性表达,结缔组织α-肌动蛋白抗原阳性表达,S-100和α-肌动蛋白抗原可作为组织工程化软骨的鉴定指标.
배경:통상채용아신람염색기술감정연골조직,연이대우조직공정연골형성조기,아신람염색불능흔호적현시세포외기질적분비정황.목적:의관찰채용면역조직화학법S-100항원결합α-기동단백항원염색감별인공합성조직공정화연골결구적가행성.설계、시간급지점:대비관찰,우2006-12/2008-02재심수시인민의원림상의학연구중심완성.재료:2주령SPF급SD대서,체질량50～60 g,용우체외배양검돌연골세포;DegraPol재료,장20 mm,내,외경분별위2.5/4 mm,관벽후도위0.75 mm,유서사련방리공대학취합재료연구소제공.방법:우제3대수집연골세포접충우DegraPol관상지가형성연골세포-지가복합물,체외배양3주후식입동계대서복강대망막체내배양1주.분별우체외배양3주화체내배양1주후취연골세포-DegraPol복합물제비조직학검측표본행소목정-이홍염색화S-100항원、α-기동단백항체면역조직화학염색.주요관찰지표:도치현미경관찰연골세포-DegraPol복합물적변화;면역조직화학염색감정연골세포.결과:체외배양3주후,소목정-이홍염색현시연골세포위우연골함와내,연골기질정람색.충식연골세포우DegraPol관상포말재료지가내측면,체외배양3주후,재관강적내측벽S-100항원양성표체,α-기동단백항원음성.증실재세포-지가복합물식입동계대서체내배양지전이경형성료신적조직공정화연골층.치입동물체내배양1주후,소획득적신조직위혼합성적세포결구,S-100항원양성다집중재관강적내측벽,이α-기동단백항원양성반응다집중재관강적외측벽.결론:연골조직S-100항원양성표체,결체조직α-기동단백항원양성표체,S-100화α-기동단백항원가작위조직공정화연골적감정지표.