解放军医学杂志
解放軍醫學雜誌
해방군의학잡지
MEDICAL JOURNAL OF CHINESE PEOPLE'S LIBERATION ARMY
2008年
2期
187-189
,共3页
程永波%房殿春%杨海捷%罗元辉
程永波%房殿春%楊海捷%囉元輝
정영파%방전춘%양해첩%라원휘
人端粒酶反转录酶%甲基化%MZF-2
人耑粒酶反轉錄酶%甲基化%MZF-2
인단립매반전록매%갑기화%MZF-2
目的 检测人端粒酶反转录酶(hTERT)基因启动子区甲基化状态.方法 采用TRAP法检测细胞端粒酶活性,免疫荧光法观察hTERT表达;选择hTERT启动子中-692～-403bp共290bp为靶序列,采取亚硫酸氢钠修饰和测序法(BSP)检测2种胃癌细胞株中靶序列甲基化状态并作分析.结果 端粒酶和hTERT在SGC-7901和BGC-823胃癌细胞株中都有表达;PCR扩增产物测序测出-634～-403bp共232bp,经比对与亚硫酸氢钠转化前源序列对应良好,此序列段26个CpG胞嘧啶中,BGC-823细胞株有25个发生甲基化,SGC-7901细胞株全部发生甲基化,经检索此序列段含2个MZF-2结合域即2个锌指基序,但仅可结合MZF-2一个转录调节因子.结论 高甲基化改变了DNA的空间结构可能是hTERT启动子高甲基化上调hTERT表达的原因之一,从而阻断了MZF-2与锌指基序的结合.
目的 檢測人耑粒酶反轉錄酶(hTERT)基因啟動子區甲基化狀態.方法 採用TRAP法檢測細胞耑粒酶活性,免疫熒光法觀察hTERT錶達;選擇hTERT啟動子中-692～-403bp共290bp為靶序列,採取亞硫痠氫鈉脩飾和測序法(BSP)檢測2種胃癌細胞株中靶序列甲基化狀態併作分析.結果 耑粒酶和hTERT在SGC-7901和BGC-823胃癌細胞株中都有錶達;PCR擴增產物測序測齣-634～-403bp共232bp,經比對與亞硫痠氫鈉轉化前源序列對應良好,此序列段26箇CpG胞嘧啶中,BGC-823細胞株有25箇髮生甲基化,SGC-7901細胞株全部髮生甲基化,經檢索此序列段含2箇MZF-2結閤域即2箇鋅指基序,但僅可結閤MZF-2一箇轉錄調節因子.結論 高甲基化改變瞭DNA的空間結構可能是hTERT啟動子高甲基化上調hTERT錶達的原因之一,從而阻斷瞭MZF-2與鋅指基序的結閤.
목적 검측인단립매반전록매(hTERT)기인계동자구갑기화상태.방법 채용TRAP법검측세포단립매활성,면역형광법관찰hTERT표체;선택hTERT계동자중-692～-403bp공290bp위파서렬,채취아류산경납수식화측서법(BSP)검측2충위암세포주중파서렬갑기화상태병작분석.결과 단립매화hTERT재SGC-7901화BGC-823위암세포주중도유표체;PCR확증산물측서측출-634～-403bp공232bp,경비대여아류산경납전화전원서렬대응량호,차서렬단26개CpG포밀정중,BGC-823세포주유25개발생갑기화,SGC-7901세포주전부발생갑기화,경검색차서렬단함2개MZF-2결합역즉2개자지기서,단부가결합MZF-2일개전록조절인자.결론 고갑기화개변료DNA적공간결구가능시hTERT계동자고갑기화상조hTERT표체적원인지일,종이조단료MZF-2여자지기서적결합.
