口蹄疫病毒3B基因的高效表达及其表达产物的反应活性
구제역병독3B기인적고효표체급기표체산물적반응활성
High expression of foot-and-mouth disease virus 3B gene and reactivity of the expressed protein
  • 万方数据
    中国兽医科学 중국수의과학
    VETERINARY SCIENCE IN CHINA
    2007年 10期 867-872 ,共6页

    覃健萍%徐维加%陈峰%马静云%谢青梅%刘盛梅%曹永长%毕英佐

    담건평%서유가%진봉%마정운%사청매%류성매%조영장%필영좌

    口蹄疫病毒%3B基因%高效可溶性表达%鉴别诊断ELISA 口蹄疫病毒%3B基因%高效可溶性錶達%鑒彆診斷ELISA
    구제역병독%3B기인%고효가용성표체%감별진단ELISA
    通过PCR技术获得口蹄疫病毒非结构蛋白3B基因,将其克隆至质粒pET-32a(+)和高效可溶性表达质粒pEM中,经PCR筛选,获得阳性重组子pET-3B和pEM-3B,将它们转化大肠杆菌BL21中进行诱导表达,SDS-PAGE及Western-blot检测结果证明,表达的3B融合蛋白能与FMDV感染动物血清发生特异性反应.蛋白可溶性分析表明,EM-3B融合蛋白绝大部分以可溶形式表达.以此可溶性融合蛋白EM-3B为抗原建立了可区分FMD免疫动物和感染动物的EM-3B-DIVA-ELISA方法,经检测,其特异性为95.0%,敏感性为97.5%,与2个国产试剂盒的符合率分别为96.25%和98.75%.
    통과PCR기술획득구제역병독비결구단백3B기인,장기극륭지질립pET-32a(+)화고효가용성표체질립pEM중,경PCR사선,획득양성중조자pET-3B화pEM-3B,장타문전화대장간균BL21중진행유도표체,SDS-PAGE급Western-blot검측결과증명,표체적3B융합단백능여FMDV감염동물혈청발생특이성반응.단백가용성분석표명,EM-3B융합단백절대부분이가용형식표체.이차가용성융합단백EM-3B위항원건립료가구분FMD면역동물화감염동물적EM-3B-DIVA-ELISA방법,경검측,기특이성위95.0%,민감성위97.5%,여2개국산시제합적부합솔분별위96.25%화98.75%.
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