复旦学报（医学版）
複旦學報（醫學版）
복단학보（의학판）
FUDAN UNIVERSITY JOURNAL OF MEDICAL SCIENCES
2007年
5期
635-640
,共6页
李宝华%蒋正刚%徐林%李康%熊思东
李寶華%蔣正剛%徐林%李康%熊思東
리보화%장정강%서림%리강%웅사동
集聚蛋白%柯萨奇B3病毒%星形胶质细胞
集聚蛋白%柯薩奇B3病毒%星形膠質細胞
집취단백%가살기B3병독%성형효질세포
目的 检测柯萨奇B3病毒(coxsackievirus group B type 3,CVB3)感染体外培养的星形胶质细胞后集聚蛋白(agrin)的表达变化及其意义.方法 采用免疫细胞化学的方法鉴定培养的星形胶质细胞,在显微镜下观察CVB3感染后的细胞形态,并用RT-PCR方法扩增CVB3 RNA的正负链以确证感染成功.用RT-PCR检测CVB3感染细胞后agrin的动态表达变化.用脂质体将agrin反义质粒pcDNA3-As-AG转染到星形胶质细胞,并用RT-PCR检测转染的细胞中agrin的表达.3H-TdR掺入法测定CVB3不同感染时间点的星形胶质细胞裂解液和经agrin反义质粒pcDNA-As-AG转染细胞后的细胞裂解液对T细胞增殖的影响.结果 (1)CVB3感染星形胶质细胞后agrin的表达水平下调.(2)病毒感染后随着agrin表达量的降低,星形胶质细胞裂解液对T细胞的活化增殖作用也降低.未转染和空质粒转染的细胞裂解液对T细胞的活化增殖有促进作用,而用反义核酸技术下调星形胶质细胞agrin表达后,星形胶质细胞裂解液对T细胞增殖的促进作用也随之下降,进一步证实agrin表达水平的下调可影响T细胞的活化和增殖.结论 CVB3感染星形胶质细胞后agrin表达水平下调,降低对T细胞活化增殖的能力,这可能是CVB3病毒性脑炎中,病毒逃逸机体免疫清除的一种机制.
目的 檢測柯薩奇B3病毒(coxsackievirus group B type 3,CVB3)感染體外培養的星形膠質細胞後集聚蛋白(agrin)的錶達變化及其意義.方法 採用免疫細胞化學的方法鑒定培養的星形膠質細胞,在顯微鏡下觀察CVB3感染後的細胞形態,併用RT-PCR方法擴增CVB3 RNA的正負鏈以確證感染成功.用RT-PCR檢測CVB3感染細胞後agrin的動態錶達變化.用脂質體將agrin反義質粒pcDNA3-As-AG轉染到星形膠質細胞,併用RT-PCR檢測轉染的細胞中agrin的錶達.3H-TdR摻入法測定CVB3不同感染時間點的星形膠質細胞裂解液和經agrin反義質粒pcDNA-As-AG轉染細胞後的細胞裂解液對T細胞增殖的影響.結果 (1)CVB3感染星形膠質細胞後agrin的錶達水平下調.(2)病毒感染後隨著agrin錶達量的降低,星形膠質細胞裂解液對T細胞的活化增殖作用也降低.未轉染和空質粒轉染的細胞裂解液對T細胞的活化增殖有促進作用,而用反義覈痠技術下調星形膠質細胞agrin錶達後,星形膠質細胞裂解液對T細胞增殖的促進作用也隨之下降,進一步證實agrin錶達水平的下調可影響T細胞的活化和增殖.結論 CVB3感染星形膠質細胞後agrin錶達水平下調,降低對T細胞活化增殖的能力,這可能是CVB3病毒性腦炎中,病毒逃逸機體免疫清除的一種機製.
목적 검측가살기B3병독(coxsackievirus group B type 3,CVB3)감염체외배양적성형효질세포후집취단백(agrin)적표체변화급기의의.방법 채용면역세포화학적방법감정배양적성형효질세포,재현미경하관찰CVB3감염후적세포형태,병용RT-PCR방법확증CVB3 RNA적정부련이학증감염성공.용RT-PCR검측CVB3감염세포후agrin적동태표체변화.용지질체장agrin반의질립pcDNA3-As-AG전염도성형효질세포,병용RT-PCR검측전염적세포중agrin적표체.3H-TdR참입법측정CVB3불동감염시간점적성형효질세포렬해액화경agrin반의질립pcDNA-As-AG전염세포후적세포렬해액대T세포증식적영향.결과 (1)CVB3감염성형효질세포후agrin적표체수평하조.(2)병독감염후수착agrin표체량적강저,성형효질세포렬해액대T세포적활화증식작용야강저.미전염화공질립전염적세포렬해액대T세포적활화증식유촉진작용,이용반의핵산기술하조성형효질세포agrin표체후,성형효질세포렬해액대T세포증식적촉진작용야수지하강,진일보증실agrin표체수평적하조가영향T세포적활화화증식.결론 CVB3감염성형효질세포후agrin표체수평하조,강저대T세포활화증식적능력,저가능시CVB3병독성뇌염중,병독도일궤체면역청제적일충궤제.
