CAJ | 학술논문

目的研究表皮生长因子(epidermal growth factor,EGF)诱导人晶状体上皮细胞移行及其信号通路机制.方法培养人晶状体上皮细胞,用不同浓度EGF处理24 h后,Phagokinetic Track Motility分析细胞的移动性;EGF(100 μg·L-1)孵育细胞不同时间后,Western blot法检测磷酸化EGFR和AKT,并分别用PD153035(EGFR激酶抑制剂)和LY294002(PI3K/AKT抑制剂)预孵育细胞,观察上述指标;EGF(100 μg·L-1)孵育细胞不同时间(12 h、24 h、48 h)后,用酶谱法分析基质金属蛋白酶-2(matrix metallopreteinase2,MMP-2),并用PD153035、LY294002预孵育细胞,检测MMP-2活性及细胞的移行.设立对照组,结果进行单因素方差分析,P＜0.05表明差异有统计学意义.结果 EGF可诱导培养人晶状体上皮细胞移行,并随浓度增加细胞的移动性有显著性提高;EGF可诱导EGFR和AKT磷酸化,EGF处理后5 min,EGFR和AKT的磷酸化达到峰值,作用可持续1 h,EGFR抑制剂可阻断EGF诱导的AKT磷酸化;EGF可显著提高细胞中MMP-2的活性,并随时间延长活性增强,24～48 h达到较高水平(1.4倍),PD153035、LY294002可抑制MMP-2的活性以及细胞的移行.结论在人工培养的人晶状体上皮细胞中,EGFR/PI3K/AKT通路介导了EGF刺激MMP-2的激活和体外培养人晶状体上皮细胞的移行,这一通路可被EGFR激酶抑制剂、PI3K/AKT抑制剂阻断,这些涉及的信号通路可能形成潜在的治疗后囊膜混浊的靶点.
목적 연구표피생장인자(epidermal growth factor,EGF)유도인정상체상피세포이행급기신호통로궤제.방법 배양인정상체상피세포,용불동농도EGF처리24 h후,Phagokinetic Track Motility분석세포적이동성;EGF(100 μg·L-1)부육세포불동시간후,Western blot법검측린산화EGFR화AKT,병분별용PD153035(EGFR격매억제제)화LY294002(PI3K/AKT억제제)예부육세포,관찰상술지표;EGF(100 μg·L-1)부육세포불동시간(12 h、24 h、48 h)후,용매보법분석기질금속단백매-2(matrix metallopreteinase2,MMP-2),병용PD153035、LY294002예부육세포,검측MMP-2활성급세포적이행.설립대조조,결과진행단인소방차분석,P＜0.05표명차이유통계학의의.결과 EGF가유도배양인정상체상피세포이행,병수농도증가세포적이동성유현저성제고;EGF가유도EGFR화AKT린산화,EGF처리후5 min,EGFR화AKT적린산화체도봉치,작용가지속1 h,EGFR억제제가조단EGF유도적AKT린산화;EGF가현저제고세포중MMP-2적활성,병수시간연장활성증강,24～48 h체도교고수평(1.4배),PD153035、LY294002가억제MMP-2적활성이급세포적이행.결론 재인공배양적인정상체상피세포중,EGFR/PI3K/AKT통로개도료EGF자격MMP-2적격활화체외배양인정상체상피세포적이행,저일통로가피EGFR격매억제제、PI3K/AKT억제제조단,저사섭급적신호통로가능형성잠재적치료후낭막혼탁적파점.