中国修复重建外科杂志
中國脩複重建外科雜誌
중국수복중건외과잡지
CHINESE JOURNAL OF REPARATIVE AND RECONSTRUCTIVE SURGERY
2007年
1期
1-5
,共5页
张宁%胡志毅%殷国勇%范卫民%陶松年%王道新%董天华
張寧%鬍誌毅%慇國勇%範衛民%陶鬆年%王道新%董天華
장저%호지의%은국용%범위민%도송년%왕도신%동천화
G蛋白偶联受体激酶结合蛋白1%Paxillin%血小板源性生长因子%成骨细胞迁移
G蛋白偶聯受體激酶結閤蛋白1%Paxillin%血小闆源性生長因子%成骨細胞遷移
G단백우련수체격매결합단백1%Paxillin%혈소판원성생장인자%성골세포천이
目的 探索G蛋白偶联受体激酶结合蛋白1(G protein coupled receptor kinase interacting protein 1, GIT1)的RNA发夹结构(hairpin)(GIT1-RNAh)对成骨细胞迁移的影响,并分析其机制.方法 取培养至第6代的鼠成骨细胞,随机分成两组,分别用包含GIT1-RNAh(实验组)和绿色荧光蛋白(green fluoresence protein, GFP)的RNA发夹结构(GFP-RNAh)的腺病毒(对照组)感染12 h后,再将每组分成有、无血小板源性生长因子(platelet drived growth factor, PDGF)刺激的两组.免疫荧光染色方法检测成骨细胞内源性GIT1蛋白表达和Paxillin的位置.Western Blot检测Paxillin的磷酸化.构建包含蓝色荧光蛋白的GIT1-RNAh(CFP-GIT1-RNAh)实验组和GFP-RNAh(CFP-GFP-RNAh)(对照组), 免疫荧光双染的方法检测CFP-GIT1-RNAh和 CFP-GFP-RNAh对Paxillin位置的特异性作用.用划痕愈合法检测GIT1-RNAh(实验组)和GFP-RNAh(对照组) 腺病毒对成骨细胞在PDGF刺激下的迁移能力的影响.结果 免疫组织化学观察,实验组和对照组比较,明显抑制成骨细胞内源性的GIT1蛋白表达和扰乱Paxillin的分布.Western Blot观察,和对照组相比,实验组明显抑制了Paxiliin的磷酸化(P＜0.05).划痕愈合法检测观察,和对照组相比,实验组明显抑制成骨细胞的迁移.结论 GIT1-RNAh通过扰乱Paxillin的分布和其磷酸化从而抑制成骨细胞的迁移.
目的 探索G蛋白偶聯受體激酶結閤蛋白1(G protein coupled receptor kinase interacting protein 1, GIT1)的RNA髮夾結構(hairpin)(GIT1-RNAh)對成骨細胞遷移的影響,併分析其機製.方法 取培養至第6代的鼠成骨細胞,隨機分成兩組,分彆用包含GIT1-RNAh(實驗組)和綠色熒光蛋白(green fluoresence protein, GFP)的RNA髮夾結構(GFP-RNAh)的腺病毒(對照組)感染12 h後,再將每組分成有、無血小闆源性生長因子(platelet drived growth factor, PDGF)刺激的兩組.免疫熒光染色方法檢測成骨細胞內源性GIT1蛋白錶達和Paxillin的位置.Western Blot檢測Paxillin的燐痠化.構建包含藍色熒光蛋白的GIT1-RNAh(CFP-GIT1-RNAh)實驗組和GFP-RNAh(CFP-GFP-RNAh)(對照組), 免疫熒光雙染的方法檢測CFP-GIT1-RNAh和 CFP-GFP-RNAh對Paxillin位置的特異性作用.用劃痕愈閤法檢測GIT1-RNAh(實驗組)和GFP-RNAh(對照組) 腺病毒對成骨細胞在PDGF刺激下的遷移能力的影響.結果 免疫組織化學觀察,實驗組和對照組比較,明顯抑製成骨細胞內源性的GIT1蛋白錶達和擾亂Paxillin的分佈.Western Blot觀察,和對照組相比,實驗組明顯抑製瞭Paxiliin的燐痠化(P＜0.05).劃痕愈閤法檢測觀察,和對照組相比,實驗組明顯抑製成骨細胞的遷移.結論 GIT1-RNAh通過擾亂Paxillin的分佈和其燐痠化從而抑製成骨細胞的遷移.
목적 탐색G단백우련수체격매결합단백1(G protein coupled receptor kinase interacting protein 1, GIT1)적RNA발협결구(hairpin)(GIT1-RNAh)대성골세포천이적영향,병분석기궤제.방법 취배양지제6대적서성골세포,수궤분성량조,분별용포함GIT1-RNAh(실험조)화록색형광단백(green fluoresence protein, GFP)적RNA발협결구(GFP-RNAh)적선병독(대조조)감염12 h후,재장매조분성유、무혈소판원성생장인자(platelet drived growth factor, PDGF)자격적량조.면역형광염색방법검측성골세포내원성GIT1단백표체화Paxillin적위치.Western Blot검측Paxillin적린산화.구건포함람색형광단백적GIT1-RNAh(CFP-GIT1-RNAh)실험조화GFP-RNAh(CFP-GFP-RNAh)(대조조), 면역형광쌍염적방법검측CFP-GIT1-RNAh화 CFP-GFP-RNAh대Paxillin위치적특이성작용.용화흔유합법검측GIT1-RNAh(실험조)화GFP-RNAh(대조조) 선병독대성골세포재PDGF자격하적천이능력적영향.결과 면역조직화학관찰,실험조화대조조비교,명현억제성골세포내원성적GIT1단백표체화우란Paxillin적분포.Western Blot관찰,화대조조상비,실험조명현억제료Paxiliin적린산화(P＜0.05).화흔유합법검측관찰,화대조조상비,실험조명현억제성골세포적천이.결론 GIT1-RNAh통과우란Paxillin적분포화기린산화종이억제성골세포적천이.
