厦门大学学报（自然科学版）
廈門大學學報（自然科學版）
하문대학학보（자연과학판）
JOURNAL OF XIAMEN UNIVERSITY (NATURAL SCIENCE)
2007年
1期
96-99
,共4页
谢莲英%张长弓%吴娜%王臻%颜江华
謝蓮英%張長弓%吳娜%王臻%顏江華
사련영%장장궁%오나%왕진%안강화
脂联素%基因构建%蛋白表达%生物活性
脂聯素%基因構建%蛋白錶達%生物活性
지련소%기인구건%단백표체%생물활성
根据脂联素cDNA序列设计并合成9条寡聚核苷酸片段,经重叠PCR技术获得重组人脂联素基因.构建pET-22b(+)/ADPN表达载体,转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导表达.目的蛋白以包涵体的形式表达,表达量占菌体总蛋白的30%以上.表达产物通过Ni-NTA柱纯化,SDS-PAGE分析显示,其分子量约为30 ku,与预期结果一致.内皮细胞生长抑制实验证实,重组人脂联素生理浓度下具有抑制人内皮细胞生长的活性并呈时间依赖性.以上工作为进一步研究脂联素的生物学功能奠定了基础.
根據脂聯素cDNA序列設計併閤成9條寡聚覈苷痠片段,經重疊PCR技術穫得重組人脂聯素基因.構建pET-22b(+)/ADPN錶達載體,轉化大腸桿菌BL21(DE3),IPTG誘導錶達.目的蛋白以包涵體的形式錶達,錶達量佔菌體總蛋白的30%以上.錶達產物通過Ni-NTA柱純化,SDS-PAGE分析顯示,其分子量約為30 ku,與預期結果一緻.內皮細胞生長抑製實驗證實,重組人脂聯素生理濃度下具有抑製人內皮細胞生長的活性併呈時間依賴性.以上工作為進一步研究脂聯素的生物學功能奠定瞭基礎.
근거지련소cDNA서렬설계병합성9조과취핵감산편단,경중첩PCR기술획득중조인지련소기인.구건pET-22b(+)/ADPN표체재체,전화대장간균BL21(DE3),IPTG유도표체.목적단백이포함체적형식표체,표체량점균체총단백적30%이상.표체산물통과Ni-NTA주순화,SDS-PAGE분석현시,기분자량약위30 ku,여예기결과일치.내피세포생장억제실험증실,중조인지련소생리농도하구유억제인내피세포생장적활성병정시간의뢰성.이상공작위진일보연구지련소적생물학공능전정료기출.
