中国水产科学
中國水產科學
중국수산과학
Journal of Fishery Sciences of China
2006年
6期
885-890
,共6页
汪登强%危起伟%罗晓松%方耀林
汪登彊%危起偉%囉曉鬆%方耀林
왕등강%위기위%라효송%방요림
鲟形目%rDNA%PCR%限制性位点
鱘形目%rDNA%PCR%限製性位點
심형목%rDNA%PCR%한제성위점
使用长PCR技术扩增鲟形目(Acipenseriformes)15个种的核糖体DNA(rDNA)18S rRNA基因与28S rRNA基因之间约2.5kb的片段,并用7个限制性内切酶对该片段进行限制性位点分析.结果显示,使用LA Taq DNA聚合酶及GC Buffer结合长PCR技术能够很好地扩增鲟形目鱼类的rDNA.根据酶切图谱可确定93个限制性位点,其中21个为保守位点,72个多态信息位点.HhaⅠ酶切的带型在所有个体中完全一致,提示这些位点对保持rDNA的功能有重要作用.一些酶的酶切产物长度之和大于扩增产物的长度,暗示鲟形目鱼类个体内存在多个rDNA等位基因.对种间遗传距离进行计算,并构建UPGMA分子系统树,发现鲟科鱼类的系统关系与以往研究有较大差别,这可能是受个体内rDNA等位基因存在的影响,说明用酶切片段来重建鲟科鱼类的系统树不太可靠.文中还讨论了高GC含量模板的PCR扩增和rDNA在鲟形目分子系统关系中的使用.
使用長PCR技術擴增鱘形目(Acipenseriformes)15箇種的覈糖體DNA(rDNA)18S rRNA基因與28S rRNA基因之間約2.5kb的片段,併用7箇限製性內切酶對該片段進行限製性位點分析.結果顯示,使用LA Taq DNA聚閤酶及GC Buffer結閤長PCR技術能夠很好地擴增鱘形目魚類的rDNA.根據酶切圖譜可確定93箇限製性位點,其中21箇為保守位點,72箇多態信息位點.HhaⅠ酶切的帶型在所有箇體中完全一緻,提示這些位點對保持rDNA的功能有重要作用.一些酶的酶切產物長度之和大于擴增產物的長度,暗示鱘形目魚類箇體內存在多箇rDNA等位基因.對種間遺傳距離進行計算,併構建UPGMA分子繫統樹,髮現鱘科魚類的繫統關繫與以往研究有較大差彆,這可能是受箇體內rDNA等位基因存在的影響,說明用酶切片段來重建鱘科魚類的繫統樹不太可靠.文中還討論瞭高GC含量模闆的PCR擴增和rDNA在鱘形目分子繫統關繫中的使用.
사용장PCR기술확증심형목(Acipenseriformes)15개충적핵당체DNA(rDNA)18S rRNA기인여28S rRNA기인지간약2.5kb적편단,병용7개한제성내절매대해편단진행한제성위점분석.결과현시,사용LA Taq DNA취합매급GC Buffer결합장PCR기술능구흔호지확증심형목어류적rDNA.근거매절도보가학정93개한제성위점,기중21개위보수위점,72개다태신식위점.HhaⅠ매절적대형재소유개체중완전일치,제시저사위점대보지rDNA적공능유중요작용.일사매적매절산물장도지화대우확증산물적장도,암시심형목어류개체내존재다개rDNA등위기인.대충간유전거리진행계산,병구건UPGMA분자계통수,발현심과어류적계통관계여이왕연구유교대차별,저가능시수개체내rDNA등위기인존재적영향,설명용매절편단래중건심과어류적계통수불태가고.문중환토론료고GC함량모판적PCR확증화rDNA재심형목분자계통관계중적사용.
