中国海洋大学学报（自然科学版）
中國海洋大學學報（自然科學版）
중국해양대학학보（자연과학판）
PERIODICAL OF OCEAN UNIVERSITY OF CHINA
2006年
2期
255-260
,共6页
韩宝芹%菊林%刘万顺%郝日光
韓寶芹%菊林%劉萬順%郝日光
한보근%국림%류만순%학일광
壳聚糖酶%分离纯化%酶学性质%壳寡糖
殼聚糖酶%分離純化%酶學性質%殼寡糖
각취당매%분리순화%매학성질%각과당
以本实验室分离的产壳聚糖酶YJ02菌株出发,制备壳聚糖酶发酵液,经离心、(NH4)2SO4分级盐析、Q-Sepharose Fast Flow阴离子交换、Sephacry S-100 凝胶过滤分离纯化步骤,SDS-PAGE显示为一条带,壳聚糖酶纯化了28.9倍,收率为47.6%.该酶的性质研究表明,该酶的分子量为66.2KD,最适反应温度为50℃,最适反应pH为6.0;Mn2+对酶活力有明显的促进作用,Cu2+,Fe3+,Hg2+对酶活力有抑制作用;小分子有机物EDTA和SDS对酶活力有抑制作用,而IAA和β-巯基乙醇对酶活力稍有促进作用.该壳聚糖酶对高脱乙酰度壳聚糖底物水解作用强,酶解位点可能为NGlc-NGlc,酶最大反应速度Vmax=4.1μmol/min,常数Km为64mmol/L.此壳聚糖酶水解壳聚糖制备的壳寡糖数均分子量为2 400Da.
以本實驗室分離的產殼聚糖酶YJ02菌株齣髮,製備殼聚糖酶髮酵液,經離心、(NH4)2SO4分級鹽析、Q-Sepharose Fast Flow陰離子交換、Sephacry S-100 凝膠過濾分離純化步驟,SDS-PAGE顯示為一條帶,殼聚糖酶純化瞭28.9倍,收率為47.6%.該酶的性質研究錶明,該酶的分子量為66.2KD,最適反應溫度為50℃,最適反應pH為6.0;Mn2+對酶活力有明顯的促進作用,Cu2+,Fe3+,Hg2+對酶活力有抑製作用;小分子有機物EDTA和SDS對酶活力有抑製作用,而IAA和β-巰基乙醇對酶活力稍有促進作用.該殼聚糖酶對高脫乙酰度殼聚糖底物水解作用彊,酶解位點可能為NGlc-NGlc,酶最大反應速度Vmax=4.1μmol/min,常數Km為64mmol/L.此殼聚糖酶水解殼聚糖製備的殼寡糖數均分子量為2 400Da.
이본실험실분리적산각취당매YJ02균주출발,제비각취당매발효액,경리심、(NH4)2SO4분급염석、Q-Sepharose Fast Flow음리자교환、Sephacry S-100 응효과려분리순화보취,SDS-PAGE현시위일조대,각취당매순화료28.9배,수솔위47.6%.해매적성질연구표명,해매적분자량위66.2KD,최괄반응온도위50℃,최괄반응pH위6.0;Mn2+대매활력유명현적촉진작용,Cu2+,Fe3+,Hg2+대매활력유억제작용;소분자유궤물EDTA화SDS대매활력유억제작용,이IAA화β-구기을순대매활력초유촉진작용.해각취당매대고탈을선도각취당저물수해작용강,매해위점가능위NGlc-NGlc,매최대반응속도Vmax=4.1μmol/min,상수Km위64mmol/L.차각취당매수해각취당제비적각과당수균분자량위2 400Da.
