重庆医学
重慶醫學
중경의학
CHONGQING MEDICAL JOURNAL
2003年
12期
1676-1678
,共3页
王吉刚%梁后杰%史曦凯%陈洁平%张翼军
王吉剛%樑後傑%史晞凱%陳潔平%張翼軍
왕길강%량후걸%사희개%진길평%장익군
CTLA-4%骨髓基质细胞%移植物抗宿主病%腺病毒载体%免疫耐受%无能%共刺激信号
CTLA-4%骨髓基質細胞%移植物抗宿主病%腺病毒載體%免疫耐受%無能%共刺激信號
CTLA-4%골수기질세포%이식물항숙주병%선병독재체%면역내수%무능%공자격신호
目的通过腺病毒介导CTLA4Ig在骨髓基质细胞(bone marrow stromal cels,BMSCs)中表达,探讨CTLA4Ig体外诱导T细胞特异性免疫耐受的可行性及其机制,并观察该基因修饰的BMSCs促进造血的功能.方法以CTLA4Ig-重组腺病毒按感染复数(mutiplicity of infection,MOI)50转染BMSCs,利用亲和层析的方法纯化培养上清中的目的蛋白CTLA4Ig,加入到混合淋巴细胞反应(mixed lymphocyte reaction,MLR)体系中,通过MTT显色观察其抑制淋巴细胞增殖的生物学效应,以ELISA检测体系中IL-2的水平;通过BMSCs支持CD34+细胞扩增,观察基因修饰对其支持造血的影响.结果纯化的CTLA4Ig对MLR反应体系中淋巴细胞的增殖有明显的抑制作用,且在一定范围内与CTLA4Ig的浓度呈依赖性关系;体系中IL-2水平与淋巴细胞数有相似的变化趋势,且成正相关(r=0.852 2);CTLA4Ig组的淋巴细胞数与IL-2水平与对照组相差显著(P＜0.05),但支持CD34+细胞扩增的能力无显著差异(P＞0.05).结论 CTLA4Ig的表达能有效阻断B7-CD28/CTLA4共刺激信号途径,从而抑制T细胞活化,抑制IL-2的产生;而该基因的表达未明显影响BMSCs支持造血的功能.
目的通過腺病毒介導CTLA4Ig在骨髓基質細胞(bone marrow stromal cels,BMSCs)中錶達,探討CTLA4Ig體外誘導T細胞特異性免疫耐受的可行性及其機製,併觀察該基因脩飾的BMSCs促進造血的功能.方法以CTLA4Ig-重組腺病毒按感染複數(mutiplicity of infection,MOI)50轉染BMSCs,利用親和層析的方法純化培養上清中的目的蛋白CTLA4Ig,加入到混閤淋巴細胞反應(mixed lymphocyte reaction,MLR)體繫中,通過MTT顯色觀察其抑製淋巴細胞增殖的生物學效應,以ELISA檢測體繫中IL-2的水平;通過BMSCs支持CD34+細胞擴增,觀察基因脩飾對其支持造血的影響.結果純化的CTLA4Ig對MLR反應體繫中淋巴細胞的增殖有明顯的抑製作用,且在一定範圍內與CTLA4Ig的濃度呈依賴性關繫;體繫中IL-2水平與淋巴細胞數有相似的變化趨勢,且成正相關(r=0.852 2);CTLA4Ig組的淋巴細胞數與IL-2水平與對照組相差顯著(P＜0.05),但支持CD34+細胞擴增的能力無顯著差異(P＞0.05).結論 CTLA4Ig的錶達能有效阻斷B7-CD28/CTLA4共刺激信號途徑,從而抑製T細胞活化,抑製IL-2的產生;而該基因的錶達未明顯影響BMSCs支持造血的功能.
목적통과선병독개도CTLA4Ig재골수기질세포(bone marrow stromal cels,BMSCs)중표체,탐토CTLA4Ig체외유도T세포특이성면역내수적가행성급기궤제,병관찰해기인수식적BMSCs촉진조혈적공능.방법이CTLA4Ig-중조선병독안감염복수(mutiplicity of infection,MOI)50전염BMSCs,이용친화층석적방법순화배양상청중적목적단백CTLA4Ig,가입도혼합림파세포반응(mixed lymphocyte reaction,MLR)체계중,통과MTT현색관찰기억제림파세포증식적생물학효응,이ELISA검측체계중IL-2적수평;통과BMSCs지지CD34+세포확증,관찰기인수식대기지지조혈적영향.결과순화적CTLA4Ig대MLR반응체계중림파세포적증식유명현적억제작용,차재일정범위내여CTLA4Ig적농도정의뢰성관계;체계중IL-2수평여림파세포수유상사적변화추세,차성정상관(r=0.852 2);CTLA4Ig조적림파세포수여IL-2수평여대조조상차현저(P＜0.05),단지지CD34+세포확증적능력무현저차이(P＞0.05).결론 CTLA4Ig적표체능유효조단B7-CD28/CTLA4공자격신호도경,종이억제T세포활화,억제IL-2적산생;이해기인적표체미명현영향BMSCs지지조혈적공능.
